Abbott гепатит

Abbott гепатит

Переезд склада в Европу.
Реализуем препараты от гепатита С в России по закупочной цене - ликвидация склада
Перейти на сайт

Contribution of hepatitis E virus in acute sporadic hepatitis in north western India
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3510896/

Вирус гепатита Е (HEV) вызывает острый вирусный гепатит. Большинство документированных исследований по гепатиту E были сфокусированы на распространенности этого заболевания в северной и южной центральной Индии. Имеются ограниченные данные о заражении HEV среди острых эпизодов эпизодического гепатита в северо-западной Индии. Настоящее исследование было проведено для изучения вклада инфекции вируса гепатита Е в эпизоды спорадического гепатита в Раджастане и соседних государствах.

Семьсот тридцать шесть пациентов, подозреваемых в наличии вирусного гепатита, были подвергнуты скринингу на гепатотропные вирусные маркеры, гепатит А, В, С и Е, используя коммерческие комплекты иммуноферментного анализа с высокой чувствительностью и специфичностью. Острый характер заражения HEV также подтверждается обнаружением РНК HEV вложенной RT-PCR.

Было обнаружено, что гепатит Е является основной причиной острого спорадического вирусного гепатита (49,7%) в этом регионе Индии. Также были обнаружены смешанные инфекции HEV-HAV (1,2%), HEV-HBV (6,1%) и HEV-HCV (1,7%). Никакого вирусного маркера не было обнаружено в 32-процентных случаях.

HEV был признан основным этиологическим агентом острого спорадического вирусного гепатита в Раджастане (северо-западная Индия). Важно проводить скрининг в первую очередь для всех распространенных гепатотропных вирусных маркеров с энтерально и парентерально передаваемыми при остром спорадическом вирусном гепатите. Необходимо провести дополнительные серологические и молекулярные тесты для идентификации этиологического агента в случаях острого гепатита.

Гепатит Е был впервые обнаружен во время эпидемии гепатита в Кашмирской долине в 1978 году. Это болезнь, передающаяся через кишечник, которая распространяется через фекальное загрязнение питьевой воды. Это происходит как в виде эпидемий, так и спорадической инфекции в развивающихся странах2-5. По данным Регионального отделения Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) Юго-Восточной Азии, гепатит E широко распространен в развивающихся странах, на долю которого приходится до 90 процентов всех спорадических случаев острого вирусного гепатита6. Вирус гепатита Е поражает молодых людей среднего возраста и вызывает высокую смертность у беременных женщин, 20-30 процентов по сравнению с 0,2-1 процента среди населения в целом7. Он был замешан в качестве важного этиологического агента для спорадической фульминантной печеночной недостаточности (FHF) в развивающихся странах8.

Этиология острого вирусного гепатита (AVH) не может быть дифференцирована на основе способа представления; подтверждение делается серологически. Вирус гепатита Е является важным гепатотропным вирусом, который вызывает острый вирусный гепатит. Большинство исследований, посвященных распространенности вируса гепатита Е, обусловлены эпидемией, а некоторые — спорадическими. Поэтому настоящее исследование было предпринято для исследования этиологии случайных случаев AVH в Раджастане и соседних государствах для вируса гепатита A (HAV), вируса гепатита B (HBV), вируса гепатита C (HCV) и вируса гепатита E (HEV). Острый характер заражения HEV также подтверждается обнаружением РНК HEV вложенной RT-PCR.

Пациенты: с января 2006 года по июль 2008 года образцы сыворотки были собраны у 736 особей (в возрасте 10-70 лет) из последовательных случаев острого гепатита у взрослых в возрасте 14-60 лет и только у 4 детей (в возрасте 10-14 лет), подозреваемых в наличии вирусного гепатита , посещение OPD и подопечных Департамента гастроэнтерологии, больницы Sawai Man Singh (SMS), Джайпура, Раджастана. СМС больница является центром третичной помощи, где пациенты происходят не только из Раджастхана, но и из соседних государств Харьяна, Пенджаб, Уттар-Пардеш и Гуджарат. Исследование было одобрено комитетом по этической этике и информированное письменное согласие было получено от пациентов. Пациенты с признаками и симптомами желтухи, лихорадки, потери аппетита, боли в животе, склеральной желтухи, измененного сенсориума, энцефалопатии и усталости были включены в исследование. Была зарегистрирована подробная история каждого пациента, включая историю путешествий, переливание крови, питание и потребление воды из внешних источников.

Иммуноанализы. Образцы крови собирали у всех пациентов в асептических условиях и центрифугировали при 1200 g. Сыворотку отделяли и хранили при -80 ° С для дальнейшего анализа. Образцы подвергали скринингу с использованием коммерчески доступного микро-ELISA для маркеров гепатита A (IgM anti-HAV, Adaltis, Испания), гепатита B (HBsAg, Biorad Monalisa HBsAg plus, IgM анти-HBc в положительных случаях HBsAg, Abbott Laboratories North Chicago, IL), гепатита C (Innotest HCV ab IV, Бельгия) и гепатита E (EIAgen HEV IgM, Adaltis, Испания). На основании серологических тестов вирусный гепатит был классифицирован как острый гепатит А (наличие IgM-анти-HAV), острый гепатит B (наличие HBsAg и IgM против HBc), а гепатит С может быть острым или хроническим (наличие анти- HCV) или острый гепатит E (наличие IgM против HEV), острый гепатит E и B (наличие анти-IgM HEV, HBsAg, IgM анти HBc) и HBV-носителя (HBsAg положительный). Набор ELISA, используемый для IgM anti HEV, был покрыт рекомбинантными белками для открытой рамки считывания (ORF) 1 и 2 с 98-процентной чувствительностью и специфичностью. ELISA выполняли согласно протоколу производителей.

Выявление и обнаружение РНК HV: обнаружение РНК HV было проведено во всех 356 IgM-анти-HEV-позитивных случаях и у 28 пациентов в течение первых пяти дней болезни, но было отрицательным для всех серологических маркеров. Экстрагированную РНК методом гуанидиния тиоцианата (GITC) хлороформа фенола с незначительной модификацией9 подвергали синтезу кДНК. Синтез кДНК проводили с использованием фермента MuLV RT, обратного праймера (20 пмоль / мл, Promega) (внешний антисмысловой: 5′-CCG AAT TCA AAG GCA TCC ATG GTG TTT GAG AAT GAC-3 ‘) RNase out (20 U / мкл, Invitrogen, UK), 0,1 М DTT и 5 мкл шаблонов при 42 ° C в течение одного часа.

После синтеза кДНК ПЦР-амплификацию проводили с использованием специфических ранее проверенных праймеров, выбранных из неструктурной области ORF-1 (номер присоединения гена-банка № M-32400) 10. Используемые праймеры представляли собой внешний смысл: 5′-CCG GAT CCA CAC ACA TCT GAG CTA CAT TCG TGA GCT-3 ‘, внешний антисмысл: 5′-CCG AAT TCA AAG GCA TCC ATG GTG TTT GAG AAT GAC-3′, внутренний смысл: 5’-GGA ATT CGA CTC CAC CCA GAA TTA CTT-3 ‘, а также внутренний антисмысловой 5′-GGA ATT CAC AGC CGG CGA TCA GGA CAG-3’. Эти два набора праймеров были сконструированы для производства сегмента 344 п.о. области ORF110. Условия термического циклирования были начальной денатурацией 94 ° С в течение 5 мин с последующим 30 циклами денатурации в течение 30 секунд при 94 ° С, отжигом в течение 30 с при 59 ° С и растяжением в течение 30 секунд при 72 ° С, а также окончательным расширением в течение 7 мин при 72 ° С. Конечные продукты ПЦР из 384 пациентов (356 IgM анти-HEV-положительных случаев и 28 отрицательных для всех маркеров, но с

За исследуемый период было выявлено 736 случаев острого спорадического гепатита. HEV была самой распространенной причиной, за которой следуют HBV, HAV и HCV. Из 736 пациентов 356 (48,3%) пациентов с острым спорадическим гепатитом были положительными только для IgM против HEV (n = 285) или в сочетании с другим вирусом (n = 71) серологией. Почти у трети пациентов вирусный маркер не обнаружен (таблица I). Среди 356, 176 были острые вирусные гепатиты (AVH), 142 имели фульминантную печеночную недостаточность (FHF) и 38 имели подострый печеночный отказ (SAHF). Не было смертности у 176 пациентов с АВГ, в то время как у 16 ​​(11,27%) больных ФХФ и у 3 (7,8%) пациентов САХФ умер. Из 142 пациентов с FHF 24 (16,9%) были положительными для HBs Ag, 4 для HAV IgM.

Этиология острого спорадического гепатита (n = 736)

Возраст представления пациентов со спорадическим острым гепатитом Е варьировался от 10 до 65 лет (среднее ± SD 32,43 ± 11,07 года). Максимальное количество случаев HEV наблюдалось в возрастной группе 15-40 лет. Среди 356 пациентов с острым спорадическим гепатитом Е с IgG против гепатита Е, 234 (65,73%) были мужчинами и 122 (34,26%) были женщинами. Из 122 последовательных женщин 49 (40,16%) были беременны. Уровень смертности у беременных женщин составил 20,41 процента (10/49), а у небеременных женщин — 4,10 процента (3/73). 17 (34,69%) беременности закончились абортом или еще рождением, а у 22 (44,89%) беременность женщин продолжала оставаться неизменной AVH или нормальная родоразрешение во время курса болезни.

У всех 736 пациентов были аномальные тесты функции печени (LFT), указывающие на острый гепатит; тесты повторялись с недельными интервалами. Средняя продолжительность аномального ЛФП составила от 11 до 15 дней после начала болезни.

Образцы сыворотки из 356 IgM-анти-HEV-положительных и 28 из 236 (11,86%) пациентов острого спорадического гепатита (в течение пяти дней болезни и отрицательных для всех серологических маркеров) были исследованы на наличие HEV-РНК для подтверждения острой природы инфекции HEV , Было обнаружено, что из 356 анти-HEV-положительных IgM 223 (62,64%) и 10 из 28 (35%) были положительными для HEV-РНК. В целом, было установлено, что 366 из 736 (49,72%) пациентов были положительными на наличие ХЭП либо с помощью ELISA, либо с помощью ПЦР.

Вирус гепатита Е является основным гепатотропным вирусом для острого вирусного гепатита. Гепатит Е существует как спорадический гепатит с периодическим возрождением. Эта инфекция отвечает за 30-70% случаев острого спорадического гепатита 11 и является основной причиной острой печеночной недостаточности (АЛФ) 12. Широко сообщалось, что HEV в первую очередь поражает молодых людей в возрасте от 15 до 40 лет в эндемическом регионе13. Аналогичные результаты были обнаружены в настоящем исследовании.

В настоящем исследовании среди 736 образцов сыворотки, полученных от пациентов с острым спорадическим гепатитом с желтухой, 366 (49,7%) были положительными только для HEV или в сочетании с другими вирусами гепатита и отвечали за примерно половину острого вирусного гепатита. О положительности HEV в диапазоне от 12,6-78,6 процента сообщалось другими людьми из разных частей Индии (таблица II) 14-19. Положительность зависит от чувствительности и специфичности используемых наборов, изучаемого населения, типа образцов, спорадических или от вспышек. Сообщается о широком варьировании чувствительности наборов ELISA с 17-100%, которая зависит от рекомбинантных антигенов HEV или синтетических пептидов, используемых в наборе, соответствующих эпитопам HEV, наборы с последовательностью ORF 2 показали мало различий в географически разнообразных штаммах по сравнению с комплекты, ориентированные на ORF3. Изменение может также происходить с партиями производителей, и антитела к различным эпитопам могут отличаться по стойкости20-22. Тест может действовать по-разному в эндемичной и неэндемичной ситуации, поскольку общее население в возрасте 40-40% было установлено, что он является анти-HEV-IgG, поэтому может возникнуть трудность провести различие между нынешней и прошлой инфекцией HEV2324. Более того, у иммунокомпрометированных индивидуумов антитела могут сохраняться в течение 6-10 месяцев. Таким образом, анти-HEV IgM один может не быть информативным для диагностики острых спорадических инфекций HEV в разы.

Распространенность вируса гепатита Е в Индии сообщается в различных исследованиях

В настоящем исследовании все анти-HEV-IgM-положительные образцы были протестированы на ХЭН-РНК для подтверждения острой текущей инфекции, поскольку было сообщено, что ПЦР может быть лучшим показателем для острой инфекции HEV в течение первой недели болезни, чем ELISA. В нашем исследовании 62,64% анти-HEV-IgM-положительных случаев были положительными и для HEV-РНК. Это может быть связано с тем, что виремия HEV является временной, происходит в первые два недели заражения и снижается после 1 недели начала Jaundice25. У пациентов с менее чем пятидневной историей болезни 80,7% были положительными для IgG против HEV и 85,3% для РНК HEV, как это было ранее нами отмечено26. Clayson et al. 25 наблюдали 93-процентную положительность для РНК HEV и только 79 процентов для IgM против HEV, тогда как Kumar et al. 14 сообщали о положительной положительности РНК HEV в 9,4% при AVH-случаях, но 100-процентная положительность в случаях FHF в подтвержденном IgG против HEV положительные образцы. Обнаружение РНК HEV вместе с рекомбинантным ELISA ORF2 для IgG против HEV может увеличить положительное прогностическое значение для диагностики острой инфекции HEV, особенно в эндемичных областях14. Однако обнаружение антител IgM является лучшим выбором для большинства диагностических лабораторий с серологическими установками; Тестирование РНК HEV также может проводиться в лабораториях с более высокой квалификацией в течение одной недели после появления симптомов, когда другие серологические тесты отрицательны.

В эндемичных областях инфекция HEV наблюдалась в сочетании с другими гепатотропными вирусами (HAV, HBV и HCV), что также наблюдалось в настоящем исследовании 1427-29. Двойная инфекция HAV, HBV и HCV у пациентов с острым HEV наблюдалась в 1,2, 6,1 и 1,7% случаев, соответственно, без визг. Все двойные инфекции HAV и HEV были, возможно, совместными инфекциями, поскольку они имеют общий путь передачи, и все инфицированные пациенты были менее 14 лет. Malathi et al. 27 наблюдали двойную инфекцию HEV и HAV у 13,4% пациентов с острым гепатитом у детей, а у Kumar et al28 наблюдались 4,4% пациентов с острым гепатитом у взрослых.

В нашем исследовании двойная острая инфекция HEV и HBV была зарегистрирована в 4,61 процента, а острый HEV при хронической инфекции HBV наблюдался в 1,5 процента случаев острого гепатита. Это может быть вызвано двумя причинами; одна, популяция соответствует мезоэндемичной зоне HBV; вторая причина может быть связана с реактивацией скрытого HBV из-за клинического HEV. Однако для определения такого типа инфекции имеется мало данных. В исследовании из Chennai29 двойная инфекция HEV и HBV наблюдалась у 5,4 процента взрослых пациентов с острым гепатитом. Сообщалось о степени серопозитивности анти-HEV IgM в пределах от 3,2 до 31 процента у носителей HBsAg в разных исследованиях1430, и, как подозревали, гепатит E также вызвал сверхинфекцию у носителей гепатита B31.

Суперинфекция HCV — HEV наблюдалась в 1,7% случаев, у всех из которых была история предварительного воздействия на процедуры, связанные с парентеральным путем (7 имели переливание крови 4, а 2 — наркоманы). Исследования, проведенные в Дели и Чандигархе828, свидетельствуют о двойном заражении ГЭВ-HCV в 11 и 7,4% случаев, соответственно. Позитивность HCV варьируется в разных географических регионах. Низкая положительность HCV была зарегистрирована ранее в Раджастане; 0,28% от Sood et al32 из новой частной больницы и 1,693% от Sharma et al33 из больницы третичной помощи. Мехта и др. 34 из Джодхпура сообщили о положительном эффекте HEV у доноров крови 0,27 процента. Поскольку наше исследование было связано с известными случаями AVH, положительная активность HCV на 5,1 процента и положительная положительность HCV-HCV на 1,7 процента оправданы в соответствии с местными тенденциями инфицирования HCV.

В нашем исследовании было обнаружено, что 32% пациентов были отрицательными для всех распространенных гепатротропных вирусных маркеров с помощью серологических тестов, дальнейшее тестирование на РНК HEV в 28 образцах, отрицательных для всех серологических тестов у пациентов с менее чем пятидневным заболеванием, помогло диагностировать инфекцию HEV в дополнительных пациентов. Однако необходимо провести дополнительные серологические и молекулярные тесты для идентификации этиологических агентов в серологически отрицательных случаях для HAV, HBV, HCV и HEV, чтобы определить, существуют ли в этом вирусе другие вирусы, такие как гепатит G (HGV), вирус сена, вирус TT и т. Д. часть Индии или вариант любого другого известного патогена.



Источник: rupubmed.com


Добавить комментарий