Как правильно сдать пцр на гепатит с

Как правильно сдать пцр на гепатит с

Переезд склада в Европу.
Реализуем препараты от гепатита С в России по закупочной цене - ликвидация склада
Перейти на сайт

ВАЖНО! Для того, что бы сохранить статью в закладки, нажмите: CTRL + D

Задать вопрос ВРАЧУ, и получить БЕСПЛАТНЫЙ ОТВЕТ, Вы можете заполнив на НАШЕМ САЙТЕ специальную форму, по этой ссылке >>>

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) сегодня является одним из самых эффективных диагностических методов.

Он дает наиболее точные и достоверные результаты.

Материалом исследования служат:

С помощью ПЦР осуществляется диагностика даже скрытые инфекции, в частности, передающиеся половым путем.

Суть такого анализа заключается в обнаружении в исследуемом материале генома возбудителя путем многократного синтеза молекул его ДНК.

С помощью ПЦР можно диагностировать бактериальные, вирусные, протозойные и грибковые инфекции.

Максимальная погрешность при таком исследовании не превышает 5%.

Кроме того, его результаты можно получить уже в день сдачи анализов.

Существуют две разновидности анализа методом ПЦР:

Качественный метод выполняется с целью обнаружения в биоматериале возбудителя болезни.

Количественный анализ ПЦР

Полимеразная цепная реакция — метод лабораторной диагностики.

ПЦР тест широко применим в медицине.

Это связано с его высокой точностью.

В основе методики определение ДНК микроорганизмов.

Проводят ПЦР диагностику, как правило, в условиях лаборатории.

Когда необходим количественный анализ ПЦР мазков и крови

Этот метод применяют в урологии, гинекологии, венерологии.

Чаще всего он необходим для постановки диагноза.

При помощи ПЦР тестировании можно обнаружить такие заболевания как:

  • Гонорея
  • Сифилис
  • Уреаплазмоз
  • Хламидиоз
  • Трихомониаз
  • Вирус папилломы человека.

Данный метод используют и при заготовке донорской крови.

Он позволяет избежать риска переливания инфицированной крови.

Количественный анализ ПЦР направлен на определение концентрации возбудителя в организме, т.е. оценку степени «заразности» больного.

Количественный ПЦР является незаменимым методом лабораторной диагностики вирусного гепатита С.

С его помощью определяют содержание в крови больного РНК вируса, выражая его в МЕ (международных единицах) или копий на 1 мл.

В тех случаях, когда гепатит С уже диагностирован, количественный анализ ПЦР выполняют по следующей схеме:

Содержание статьи:

Нужно ли каким-то образом готовиться к количественному ПЦР анализу?

Нет, специальная подготовка в этом случае не нужна.

Единственным условием является воздержание от курения за 30 минут до сдачи крови.

ПЦР количественный: гепатит С

Гепатит С – инфекционное заболевание, поражающее преимущественно печень.

Инфекция проникает через кровь.

Для того чтобы выявить возбудителя этой болезни применяют количественный ПЦР тест.

Он определяет концентрацию возбудителя в крови больного.

Чтобы определить степень заболевания, делают РНК гепатит С количественно.

Чаще всего ПЦР гепатита С делают после того, как обнаружили соответствующие антитела.

После этого тест делают на 4, 12, 24 неделю и далее через год.

Результаты количественного анализа ПЦР при диагностике гепатита С

Сдать правильно материал для анализа ПЦР это важно.

Тем не менее, нужно уметь правильно расшифровать полученные результаты.

Как интерпретируют результаты количественного анализа ПЦР при диагностике гепатита С и определении эффективности его лечения?

Стоит отметить, что вирус гепатита С обладает чрезвычайной разнородностью, устойчивостью во внешней среде.

При его низкой концентрации в крови передача его вертикальным путем или через половой контакт маловероятна.

Инфицирование и заболевание в таких случаях чаще происходит у людей с ослабленным иммунитетом.

Или сопутствующими инфекционными заболеваниями мочеполовых путей (ВИЧ, половые инфекции).

Bенеролога, пройти количественный анализ ПЦР

Помните! Расшифровать полученные данные должен только врач.

Возможно получение ложного результата.

Это зависит от того как материал транспортировался, рабочее место где делался забор крови для исследования, нарушение технологии выполнения анализа.

Поэтому следует уделить максимум внимания при выборе лаборатории.

Мазок ПЦР количественный на хламидии

Перед тем как сдать анализ ПЦР на эту инфекцию следует знать, как правильно подготовится к анализу.

Внимание! У женщин не берут материал во время менструального цикла.

Мазок следует сдавать только при соблюдении определенных правил:

  • Не использовать вагинальные свечи перед исследованием
  • Отказаться на время анализа от половых контактов
  • За две недели до исследований отметить антибиотики

Мазок у женщин берут из влагалища.

Мужчинам делают соскоб с мочеиспускательного канала.

Забор материала осуществляется специальным стерильным зондом, после чего помещается в стерильную пробирку.

Полученный результат может быть:

  • Отрицательный — инфекция в биоматериале отсутствует;
  • Положительный – в мазке присутствуют хламидии.

Количественный ПЦР анализ: ВПЧ 21 тип

С помощью такого метода можно сразу определить тип вируса.

Данный вид ВПЧ относится к распространенным.

ВПЧ существует более 100 видов.

Большая часть из них поражает кожные покровы, остальные слизистые оболочки.

Выделяют виды, которые способны вызывать онкологические заболевания, такие как рак шейки матки.

Для анализа делают забор клеток эпителия с шейки матки.

Результаты могут быть следующими:

  • Риск не обнаружен 0–3 Lg (HPV/105)
  • Возможность появления дисплазии 3–5 Lg (HPV/105)
  • Большая вероятность дисплазии 5 и выше Lg (HPV/105)

ПЦР ДНК: обнаружено

Результат ПЦР анализа положительный – в биологическом материале пациента были обнаружены фрагменты ДНК микроорганизма.

Если вы получили такой результат, как можно скорее начните лечение.

Бывают случаи, что результат получается положительным, но при этом человек себя нормально чувствует, и признаков болезни нет.

Это может означать, что заболевание находится на начальной стадии.

В таком случае следует обратиться к врачу и приступить к лечению.

Внимание! Результат анализа не является диагнозом. Схему лечения должен назначать врач.

При необходимости, специалист назначит пройти повторные исследования,

К какому врачу обращаться для сдачи количественного анализа ПЦР

Для того что бы сделать количественный ПЦР анализ, необходимо обратится в клинику.

Современное лабораторное оборудование обеспечивает точность ПЦР анализа.

Сдать мазок можно при посещении врача венеролога.

Врач проведет осмотр и возьмет материал на исследование.

После получения результата специалист поможет вам расшифровать результат и назначит необходимый курс лечения.

Получить исчерпывающую консультацию опытного венеролога, пройти количественный анализ ПЦР, а также курс эффективной терапии вы сможете, обратившись в наш платный КВД.

Помните, что качественная и своевременная диагностика – залог успешности лечения и ваш шанс на выздоровление.

О том как проходит количественный
анализ ПЦР рассказывает
подполковник медицинской службы,
врач Ленкин Сергей Геннадьевич

При необходимости любого количественного ПЦР анализа, в том числе на гепатит С, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу, урологу в Москве с 15 летним опытом работы.

  • кровь
  • моча
  • сок простаты
  • семенная жидкость
  • качественный и количественный
  • Перед началом его медикаментозного лечения
  • Через 1 неделю после начала терапии
  • На 4-й неделе лечения
  • На 12-й неделе – на этом сроке количественное определение ПЦР позволяет оценить эффективность проводимой терапии заболевания
  • На 24-й неделе терапии – заключительное обследование с целью подтверждения выздоровления

  • Уровень виремии, или вирусной нагрузки (концентрации вируса в крови) 800 000 МЕ/мл считается высоким.

Получение таких результатов означает острую фазу заболевания или реактивацию вируса.

Такой показатель говорит о высокой степени инфекционности, «заразности» человека. О том, что опасность заразиться вирусом от него в данный момент очень высока.

  • Показатель 400 000 МЕ/мл говорит о низком содержании вируса.

Это может наблюдаться при высокой степени резистентности организма.

Вследствие которой размножение и активность вируса подавляются. Или при выздоровлении, благодаря эффективной терапии.

В некоторых случаях в результатах анализа указывают показатель «ниже диапазона измерений».

Это означает, что концентрация вируса в крови ничтожно мала.

Но, все же вирус в организме присутствует, что подтверждает качественный ПЦР.

Запись в бланке с результатами анализа «Не обнаружено» означает, что в крови пациента вируса нет

Источник: http://kvd-moskva.ru/analizy-na-infektsii/423/

ВАЖНО! Для того, что бы сохранить статью в закладки, нажмите: CTRL + D

Задать вопрос ВРАЧУ, и получить БЕСПЛАТНЫЙ ОТВЕТ, Вы можете заполнив на НАШЕМ САЙТЕ специальную форму, по этой ссылке >>>

Использование ПЦР-диагностики

Полимеразной цепной реакцией (ПЦР) в молекулярной биологии называют экспериментальный метод выявления вирусов. Он позволяет значительно увеличивать концентрации определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в пробах биологического материала, что дает возможность их детерминировать (распознавать) и подсчитывать.

Проведение анализа выполняют следующим образом. Генетический материал (пробу крови), который потенциально может включать искомый ген, вносится в пробирку. Туда же помещают праймеры –синтезированные химическим путем отрезки небольшой длины искомого гена.

В сосуд также добавляют ДНК или РНК полимеразу, она способна выстроить цепочку нуклеиновой кислоты, которая полностью идентична первоначальной. В полученный состав вводят и набор из четырех свободных нуклеотидов – особого строительного материала для РНК или ДНК, один их которых содержит радиоактивные частицы фосфора.

Полученную смесь подогревают до 95–96°С, из-за чего две спирали ДНК, которые в обычном состоянии переплетены между собой, расплетаются. Затем препарат охлаждают, в это время праймеры сами прикрепляются к искомому участку генома вируса, не давая РНК (либо ДНК) вновь сформировать двойную спираль.

В процессе охлаждения полимераза отыскивает свободную цепочку нуклеотидов. Для функционирования данного фермента необходима именно одиночная цепь нуклеотидов. Поскольку полимераза проскальзывает по цепи ДНК (как кольцо по веревке), на двойной спирали она не способна работать.

После этого выполняют повторный цикл нагревания, из-за чего между собой разделяются цепочки нуклеотидов. При каждом из таких циклов ПЦР количество в пробе именно искомого гена гепатита возрастает в геометрической прогрессии, а остальной генетический материал продуцируется (вырастает) линейно.

После очистки раствора от остатков нуклеотидов и разделения при помощи электрофореза цепочек ДНК по параметру молекулярной массы, можно легко определить: есть ли искомый ген в исследуемом образце или нет.

Преимущества ПЦР

Лабораторное исследование методом ПЦР позволяет получить даже больше информации, чем просто присутствие РНК вируса. Определяя параметр уровня радиоактивного излучения, есть возможность выявить, какое количество генетического материала содержалось изначально в исследуемом образце. В случае гепатита – определить показатель уровня вирусной нагрузки.

Еще одним достоинством этого метода является очень высокая степень чувствительности реакции ЦР. Она гораздо выше, чем у классических методов выявления вирусов. В идеальном варианте, для того чтобы выявить искомый ген, для ПЦР достаточно всего одного вируса в пробе.

Кроме этого, ПЦР полностью специфична. Ее праймеры создаются таким образом, чтобы они полностью соответствовали уникальным участкам искомых генов, которых нет ни у какой другой последовательности. Как уникальны отпечатки пальцев, так и в каждом гене есть уникальные последовательности из нуклеотидов.

Качественный анализ ПЦР

Качественный анализ позволяет выявить только факт наличия вируса в крови. Этот тест нужно проводить для всех пациентов, у которых были обнаружены в крови антитела к гепатиту С. Его результатом может быть лишь одно значение из двух: «обнаружено» либо «не обнаружено». У здорового человека в норме (референсное значение) должно быть «не обнаружено».

Есть и специальная интерпретация таких результатов проведенного качественного исследования:

  • Результат «обнаружено». Это означает, что в анализируемом образце взятого биологического материала был найден фрагмент РНК, который специфичен для вируса гепатита С. Следовательно, есть факт инфицирования пациента вирусом гепатита С. Если результатом качественного ПЦР является «обнаружено», то это свидетельствует о том, что вирус размножается и в это время инфицирует в организме новые клетки печени.
  • Результат «не обнаружено». Такой вердикт говорит о том, что в анализируемом образце полученного биологического материала в данной лаборатории не обнаружен фрагмент РНК, который специфичен для вируса гепатита С. Либо же концентрация РНК инфекции-возбудителя в данном образце была ниже границы чувствительности теста.

В острой фазе РНК вируса гепатита С такие качественные исследования по методике ПЦР могут выявить уже спустя 1–2 недели непосредственно после инфицирования организма, то есть задолго до появления антител к самому гепатиту.

Недостоверные результаты анализов такого исследования могут быть получены при:

  • загрязненном биоматериале;
  • присутствии в крови пациента гепарина;
  • наличии в образце химических или белковых субстанций (ингибиторов), которые влияют на различные компоненты ПЦР.

Для проведения качественного анализа ПЦР специальной подготовки пациента к исследованию не требуется. В качестве материала используется венозная кровь.

Оценка результатов

Качественные тесты ПЦР имеют определенную степень чувствительности, и в зависимости от точности проведения исследований и уровня аппаратуры в лаборатории могут варьироваться в пределах от 10 до 500 МЕ/мл.

Это обозначает, что если вирус в пробе крови присутствует в очень малой концентрации (меньше порогового значения чувствительности данной лаборатории), то у больного пациента может быть определен результат как «не обнаружено». Из-за этого при проведении качественного анализа ПЦР с низким уровнем виремии (малой концентрацией вируса), к примеру, для больных, проходящих лечение противовирусной терапией, очень важно знать и порог чувствительности данной диагностической системы.

Варианты диагностических систем

Для контролирования вирусологического ответа, при проведении противовирусного лечения рекомендуется использовать диагностические системы с порогом чувствительности не меньше 50 МЕ/мл. Этим критериям соответствуют, к примеру: анализаторы Cobas Ampicolor ВГС-Теst (c точностью 50 МЕ/мл), а также РеалБест РНК ВГС (с чувствительностью 15 МЕ/мл).

Согласно рекомендациям ВОЗ, для установления окончательного диагноза гепатит С, необходимо основываться лишь на основании трехкратного обнаружения РНК вируса С в пробах сыворотки крови у больного, при отсутствии других разновидностей маркеров гепатита.

Кроме методов ПЦР для выявления у пациентов РНК ВГС также применяют исследование ТМА (метод транскрипционной амплификации). Он обладает лучшим порогом чувствительности (5–10 МЕ/мл), но в нашей стране такой метод тестирования пока не очень распространен.

Диапазон выявляемых модификаций вирусов

Такое качественное определении в сыворотке крови наличия РНК вируса гепатита С позволяет определять несколько генотипов этого вируса. В настоящее время науке известно более шести генотипов этого вируса, а также около 10 субтипов данного заболевания.

В нашей стране распространены вирусы 1, 2, 3 генотипов. Лаборатории могут выявлять следующие генотипы: 1а и 1в, 2а, 2в и 2с, а также 3, 4, 5а и 6 независимо от субтипов. Для всех модификаций вирусов специфичность определения составляет 100%.

Количественный анализ ПЦР

При помощи количественного теста ПЦР определяется уровень концентрации вируса гепатита в пробах крови (вирусная нагрузка). Данный тест на виремию (концентрацию вируса) позволяет определить количество единиц определенного генетического материала (самой вирусной РНК), которую выявляют в определенном объеме. В данном случае определяют его концентрацию в 1 мл, что соответствует 1 куб. см.

Количественные параметры анализа выражаются в цифрах, для этого используют как единицы измерения международные единицы (МЕ) на миллилитр (мл), обозначающийся как МЕ/мл. Сейчас в некоторых лабораториях количество вируса может определяться и в других единицах измерения: количестве копий на мл, обозначается как копии/мл.

  • Сроки проведения.Для гепатита С такой количественный анализ ПЦР делают непосредственно перед началом проведения терапии. Затем на 1-й, 4-й, 12-й и 24-й неделях. Оценивание на 12-й неделе является показательным, оно позволяет определить эффективность проведения терапии.
  • Подготовка к анализу. Для проведения количественного анализа ПЦР специальной подготовки пациента к исследованию не требуется. За полчаса до взятия проб не следует курить. В качестве лабораторного материала используется венозная кровь.

Оценка результатов

Для разных лабораторных тест-систем существуют разные коэффициенты перевода этого показателя в МЕ/мл. В среднем берут параметр пересчета, при котором 4 копии/мл=1 МЕ/мл. То есть к примеру, если лаборатория выдает результат анализа ПЦР 2,4*10 6 копий/мл, то этот параметр нужно разделить на 4 и получим 6*10 5 МЕ/мл.

Высокой считается уровень нагрузки в 800000 МЕ/мл, это примерно соответствует показателю в 3000000 копий/мл. Низкая виремия, согласно данным некоторых авторов, соответствует параметрам количественного ПЦР ниже 400000 МЕ/мл.

В результате проведения количественного теста могут быть поставлены окончательные результаты не в виде цифрового значения, а: «ниже диапазона измерений», или же «не обнаружено».

  • Оценка: «ниже диапазона измерений». Это свидетельствует о том, что количественный тест не смог выявить вирусные РНК гепатита С, однако сам вирус в организме присутствует в очень малых концентрациях. Об этом говорит дополнительно проведенный качественный тест, подтверждающий сам факт присутствия вируса.
  • Оценка: «не обнаружено». Такой результат свидетельствует, что количественный тест не обнаружил в пробе РНК вируса.

Параметр вирусной нагрузки, прежде всего, определяет степень инфекционности болезни, уровень «заразности» больного. Чем выше у пациента показатель концентрации вируса, тем больше вероятность риска передачи его другим людям. К примеру, при половых контактах с больным человеком, либо вертикальным путем. Такой количественный показатель также помогает определить эффективность проведения лечения больного.

Проведение количественного анализа ПЦК важно для противовирусной терапии, оценивания ее успешности и планирования сроков продолжительности курса. Так, при быстром ответе организма на лечение и низкой степени виремии, срок терапии может быть и сокращен.

При медленном снижении параметра количественного ПЦР противовирусную терапию следует продлить либо модифицировать. Если уровень вирусной нагрузки низкий, то это благоприятный фактор проведения терапии, если же повышенный, то применяемый метод лечение неэффективен и следует менять препараты или методы их использования.

ПЦР гепатита С

Оставьте комментарий 8,002

Гепатит С — это одно из самых опасных и трудно диагностируемых вирусных заболеваний. Для определения болезни используют метод ПЦР гепатита С. Это новая высокотехнологичная методика, что позволяет исследовать генетический материал на существование жизни в мельчайших частицах (молекулах) и наименьших количествах. Вирус гепатита очень стойкий, он способен долго жить в окружающей среде и отлично приживается в организме человека.

Что такое ПЦР?

Нынче существует огромное количество самых различных болезней. И не меньшее число методов их определения. Так как агенты инфекций научились с легкостью приживаться в окружающей среде и эволюционировать, то чтобы их диагностировать, применяются новейшие технологии. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это более быстрый и точный метод, что направлен на поиск возбудителя заболевания, путем существенного повышения части ДНК вируса гепатита в образце. О нем часто пишут: ищет иглу в стогу сена, а потом из игл строит стог.

Виды метода ПЦР

Выделяют качественный и количественный анализ на гепатит. Чтобы определить, находится ли вирус в организме, и тем, у кого нашли антитела к гепатиту С, проводят качественное тестирование. Расшифровка анализа выдает итог: «положительно»; «отрицательно». Негативное значение означает: либо человек здоров, либо агентов в крови еще недостаточно и их невозможно найти. Поэтому стоит провести повторное исследование через некоторое время.

Положительный результат говорит о существовании инфекции. Это практически всегда точное значение. Ошибочные результаты зависят обычно от человеческого фактора (неправильное хранение или несоблюдение правил проведения методики). Когда норма, итог — отрицательный. Перед проведением тестирования особых правил нет, просто берут кровь с вены.

Ежели нашли, проводят количественный анализ (вирусная нагрузка) — он дает числовые значения: сколько РНК вируса гепатита находится на данное время в установленном объеме исследуемого материала. При активном развитии инфекции ее можно обнаружить на 1−2 неделе у зараженного человека. Обычно исследуют также кровь, потому что агенты в ней свободно циркулируют.

Особенности количественного ПЦР анализа

Отличием количественного анализа есть то, что не все его проходят. Качественный — определяет наличие, а количественный — помогает с подтверждением заключения «вирус гепатита», прогнозом протекания болезни и определения хода лечения. Насколько эффективна терапия, смотрят по числу РНК до и во время лечения. Также с его помощью определяют назначение доз препаратов.

Как правило, его производят до начала излечения. Основными показаниями могут быть:

  • определение вирусной нагрузки и контроль за антивирусной терапией;
  • качественный ПЦР нашел антитела гепатита С;
  • нахождение острого и хронического гепатита С;
  • существование микст-гепатитов;
  • при планировании лечения;
  • если качественное исследование еще находит присутствие болезни по прошествии двенадцатой недели терапии.

Также смотрят, какая вирусная нагрузка при гепатите: низкая — терапия проводится успешно; повышенная — лечение не эффективно и его нужно менять.

Для чего проводится на различных этапах течения болезни?

На разных фазах заболевания исследование проводят, чтобы дать рецензию пользы лечения и планированию срока его дальнейшего проведения. При хороших ответах на терапию срок ее сокращают. В противном случае, при медлительном уходе вируса, курс лечения продлевают. ПЦР на гепатит делают на 1,4, 12, 24 неделе терапии. Когда показатели не падают по истечении 12 недель, то делают вывод, что терапия не подходит этому организму. Этот анализ используют для установления, насколько активна инфекция и какая вероятность ее передать. Например, при беременности есть риск заразить малыша. После терапии выявляют риск возобновления болезни.

Расшифровка

После проведения исследования расшифровать анализ могут не в цифрах, а словами: «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено». Количественный ПЦР более чувствителен качественного. Вывод «не обнаружено» может говорить, что инфекция не найдена. «Ниже диапазона измерений» — испытание не нашло вирус, но он есть в малой величине. В этой ситуации делают повторное исследование.

Вирусная нагрузка — определение числа инфекционного РНК в установленном объеме крови (количественно 1мл=1куб.сан). Формулируется в интернациональных замерах МЕ/мл. Отдельные лаборатории обозначают копии/мл. Расшифровать перевод компонентов в межнациональные значения различные тест-системы могут по-своему. Таблица 1. Расшифровка количественного анализа РНК вируса

Норма количественного анализа на гепатит С

Когда человек здоров, норма есть — «не обнаружено». У заболевших людей нормой будет снижение дозы вируса в результатах на логарифмическую единицу, что проявляется убыванием числа нулей в анализе на один (например, с 1*106 МЕ/мл до 1*105 МЕ/мл). Рамки диапазона концентрации вируса, что определяет амплификатор, находятся в границах 1,8*102 — 2,4*107 МЕ/мл. Трактовка исхода:

  • низкая концентрация — от 600 МЕ/мл до 3*104 МЕ/мл;
  • средняя — от 3*104 МЕ/мл до 8*105 МЕ/мл;
  • высокая — выше 8*105 МЕ/мл.

Отклонения

При изменениях результатов анализов вне нормы, это может свидетельствовать о возвращении болезни и размножении вируса. На получение недостоверного результата могут повлиять отдельные факторы, например, загрязнение образцов; присутствие в крови гепарина и веществ, замедляющих действие компонентов ПЦР; ошибки лабораторий; несоблюдение правил проведения теста.

Также результат в нескольких лабораториях может различаться, возможно, была другая методика проведения исследований. Чтобы узнать, насколько поражена печень и опасность болезни, недостаточно провести количественный ПЦР гепатита. Дополнительно проходят биохимические процедуры и биопсию.

Планируя лечение, проводят генотипирование вируса. В связи с тем, что гепатит С способен изменяться, существует несколько групп. Для разных типов лечение может отличаться. Бывают ситуации, когда присутствует несколько видов, но анализ находит один, тот, что преобладает. Тогда тест пересдают.

Плюсы метода

Методика ПЦР дает возможность дать заключение и назначить правильное лечение. Плюсы методики:

  • Быстрота результатов — не требует разграничения и выращивания видов возбудителя. Автоматизация процесса позволяет обрабатывать и изучать материал с получением результата за 4−5 часов.
  • Прямота определения возбудителя — найдя особую часть ДНК, прямо указывает на наличие недуга. Например, ИФА — находит белки-маркеры (продукты жизнедеятельности бактерий), что не дает точного подтверждения наличия болезни.
  • Специфичность — исследуется вещество, характерное только для конкретного возбудителя, что исключает реакцию на ложные совместно-реагирующие агенты.
  • Восприимчивость — может обнаружить самое малое количество вируОписание итогаса.
  • Универсальность — основывается на нахождении фрагментов ДНК или РНК конкретных организмов. Это дает возможность провести диагностику для любых агентов из одного биоматериала, если другие методы бессильны.
  • Выявляет не только явные, но и скрытые инфекции — эффективен для изучения агентов трудно выращиваемых, не выращиваемых, стойких.
  • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Посредством этого исследования провести диагностику могут каждому для удостоверения факта отсутствия болезни. Но для достоверных фактов нужно четко соблюдать инструкции. ПЦР используют в разных отраслях: криминалистике, для установления отцовства, для диагностирования различных вирусов, для выявления аллергии на лекарства, клонировании генов, мутагенезе, секвенирование ДНК.

Копирование материалов сайта возможно без предварительного согласования в случае установки активной индексируемой ссылки на наш сайт.

Внимание! Информация, опубликованная на сайте, носит исключительно ознакомительный характер и не является рекомендацией к применению. Обязательно проконсультируйтесь с вашим лечащим врачом!

Разновидности и необходимость применения исследований методом ПЦР

Вирус гепатита С — это вирус, который содержит молекулу РНК. Он способен избегать иммунного ответа организма благодаря высоким способностям к мутации. Различают шесть основных генотипов вируса и множество субтипов. В нашем регионе в основном распространены 1, 2 и 3 генотипы.

У 75–80 % болезнь переходит в хроническую форму, что вызывает фиброз печени — состояние, при котором ткани печени заменяются соединительной тканью. Фиброз, в свою очередь, приводит к раку или циррозу. Основной путь передачи заболевания — через кровь. Если у человека имеются показания к проведению теста на гепатит С, ему проводят два основных теста. Определяют антитела к вирусу, и при их отсутствии считается, что гепатита у него нет. Если же в крови обнаруживается наличие антител к вирусу гепатита, проводится анализ методом ПЦР.

РНК таким методом определяется в крови уже через 10–12 дней после инфицирования и свидетельствует о том, что вирус активно размножается в организме. В этот период обнаружить вирус другим способом просто невозможно, так как специфических антител он еще не вырабатывает и поражения печени еще незаметны при биохимических анализах и биопсии.

Разновидности исследований методом ПЦР

Анализ методом полимеразной цепной реакции имеет определенные преимущества:

  1. При таком исследовании проводится определение самого вируса, а не продуктов его жизнедеятельности. При этом существует возможность определить вид возбудителя.
  2. Методика обладает высокой специфичностью благодаря тому, что исследуется только определенный участок ДНК, уменьшается вероятность получения ошибочных результатов.
  3. Имеет очень высокую чувствительность, определяется даже минимальное количество вируса в крови.

Существует два основных метода исследования крови на гепатит С при помощи ПЦР: качественный и количественный анализ ПЦР. Качественный метод используется для определения факта наличия вируса. Всем у кого в крови были обнаружены антитела к гепатиту, проводится такой анализ. Результат может быть только двух типов: «обнаружено» и «не обнаружено», последнее значение считается нормой.

Положительный результат теста означает, что в образце были найдены фрагменты РНК вируса, что, в свою очередь, говорит о том, что человек был инфицирован гепатитом. В случае негативного результата возможны два варианта: инфицирования не было или его концентрация настолько мала, что не обнаруживается данной методикой.

Количественный метод отличается по сути исследования, по его задачам и по показаниям. Не все больные гепатитом проходят такой анализ. У него, как и у любого другого, существуют определенные цели. Определение вирусной нагрузки или количественный анализ ПЦР на РНК вируса используется:

  • для определения РНК вируса в крови и постановки диагноза «вирусный гепатит»;
  • для прогнозирования хронизации гепатита и течения болезни;
  • для мониторинга противовирусного лечения и принятия решения о его продлении, сокращении или об изменении тактики лечения.

Исследование проводится при наличии таких показаний:

  • гепатит С обнаружен при качественном исследовании и в крови обнаружены антитела;
  • при микст-гепатитах;
  • если планируется проведение противовирусной терапии;
  • во время и после лечения от гепатита С;
  • при наличии хронического и острого гепатита С.

Тест проводится для оценки количества единиц вируса в заданном объеме образца крови 1 см³ или 1 мл. Результаты приводятся в цифрах. Показатели используются: МЕ/мл, что означает международная единица на миллилитр и копии на мл, количество копий РНК в 1 мл образца. Чем выше количественный показатель анализа, тем большая вероятность передачи вируса другому человеку.

Р-ДНК — метод разветвленной ДНК. Более простой и недорогой метод. Используется для большего количества образцов, имеет невысокую чувствительность, от 500 МЕ/мл. При такой чувствительности есть вероятность не определить вирус, даже если он присутствует в крови.

ТМА — метод транскрипционной амплификации. Такая методика обнаруживает в крови нуклеиновые кислоты. Имеет невысокую стоимость и при этом высокую чувствительность, от 5–10 МЕ/мл. Относительно новая методика, позволяющая ускорить и удешевить процесс тестирования.

Результаты количественного анализа определение РНК вируса, представленные лабораторией, расшифровываются следующим образом:

Вирус в крови обнаружен. Вирусная нагрузка низкая.

Вирус обнаружен. Вирусная нагрузка высокая.

Результаты количественного анализа могут подаваться как в единицах МЕ/мл, так и в копиях на мл. При этом коэффициент перевода обычно отличается для разных лабораторий и методик. Его значения колеблются в пределах от одного до пяти, принято считать, что в среднем 1 МЕ — это 4 копии на мл.

Коэффициент пересчета, копий на мл в 1 МЕ

Применимость исследования виремии на различных этапах

Анализ применяется для обнаружения активной инфекции в организме. По его результату можно судить о том, какова вероятность передачи вируса. Это важно, например, при беременности, когда речь идет о возможности заражения ребенка от матери больной гепатитом.

Анализ проводится только после обнаружения наличия в крови антител к вирусу. Он необходим, поскольку до 25 % людей, перенесших острую форму гепатита, выздоравливают сами по себе, и у них не обнаруживается вирус при лабораторных исследованиях. Результаты используются для оценки эффективности проведения лечения и до него.

ПЦР диагностика проводится до лечения, чтобы в последующем определить его эффективность. Вероятность благоприятного исхода лечения обратно пропорциональна этому параметру. Чем он выше — тем хуже прогноз.

Во время лечения анализ проводится на 1, 4, 12, 24 неделях. Лечение дает полный вирологический ответ при условии, что вирусная нагрузка таким анализом не определяется.

Если через 12 недель после начала терапии показатель не снижается на две логарифмические единицы,то вероятнее всего эта терапия не поможет в этом конкретном случае.

В анализах падение вирусной нагрузки на логарифмическую единицу выражается в уменьшении количества нулей результата на один. Например, с 1 000 000 МЕ она должна уменьшится до 100 000 МЕ.

После лечения определяется для обнаружения рецидивов. Так, отклонение этого параметра от нормы говорит о том, что количество вируса в организме растет и, таким образом, болезнь возвращается.

Некоторые показатели, могут оказывать влияние на результат. Прежде всего, это возможная ошибка лаборатории, нарушения норм проведения исследования, норм содержания и подготовки образцов, а также:

  • загрязнение образца биоматериала;
  • наличие в крови остаточных следов гепарина;
  • присутствие в крови ингибиторов — субстанций, которые представляют собой химические соединения или белки, которые оказывают влияние на компоненты ПЦР.

Отличаться результаты исследования могут также для разных лабораторий, что обусловливается применением разных реактивов и других причин. Такое явление абсолютно нормально. Поэтому для правильной оценки эффективности лечения стоит проводить анализ в одной и той же лаборатории.

Важные замечания по поводу методики исследования:

  • По уровню вирусной нагрузки нельзя судить о степени поражения печени или тяжести протекания самого гепатита. Для оценки этих показателей, необходимо проводить дополнительные исследования, такие как биохимический анализ крови, биопсия, эластометрия и другие.
  • При планировании и противовирусной терапии, кроме показателя виремии, важно определить генотип вируса.

Источник: http://zdorovybudte.ru/gepatit/kolichestvennyj-ptsr-na-gepatit-s

ВАЖНО! Для того, что бы сохранить статью в закладки, нажмите: CTRL + D

Задать вопрос ВРАЧУ, и получить БЕСПЛАТНЫЙ ОТВЕТ, Вы можете заполнив на НАШЕМ САЙТЕ специальную форму, по этой ссылке >>>

Анализ на вирус гепатита С методом ПЦР

ВАЖНО! Сергей Бубновский: Эффективное средство от венерических заболеваний существует. Читайте далее >>

ПЦР (полимеразная цепная реакция) на гепатит С — это анализ, выявляющий антитела к возбудителю. Данное исследование настолько сложно, что стоит сначала поговорить о самом заболевании, чтобы понять суть анализа. В настоящее время во всем мире этому опасному заболеванию подвержено большое количество людей. И это только те люди, которые больны гепатитом С, а ведь существуют и другие разновидности патологии.

Зачем нужна ПЦР-диагностика?

Как известно, немалая часть успеха в лечении любого заболевания принадлежит правильной диагностике. Еще в 1983 году Кэри Муллис совершил прорыв в медицине, открыв полимеразную цепную реакцию (ПЦР). Именно благодаря этому анализу возможно точно выяснить, какая инфекция вызвала заболевание. Например, в случае с гепатитом можно точно назвать возбудителя болезни, подобрать правильное лечение.

До изобретения полимеразной цепной реакции (ПЦР) ученые могли единственным способом получить генетический материал: вырастить живое существо, которое бы содержало нужный ген. ПЦР-диагностика дает возможность вырастить такой ген без участия всего организма.

Кроме того, анализ ПЦР предоставляет такую возможность, как подбор нужного лекарства для устранения инфекции. Это очень важно при гепатите, поскольку любое неподходящее лекарство с удвоенной силой действует на печень. ПЦР позволяет выявить искомый ген за несколько часов, используя специальную аппаратуру.

Изучение этого вируса началось сравнительно недавно — лишь в 1989 году гепатит С был выделен в определенную группу и отделился от форм А и В. Вирус С имеет 40 разновидностей и способен менять свою генетическую структуру. В этом его особенность и коварство. Размножаясь в организме человека, вирусы хорошо приспосабливаются и вырабатывают антитела, которые способны противостоять многим медикаментам.

Гены вируса представляют собой РНК, которые заключены в оболочку. Заражение происходит чаще всего через кровь. В засохшей крови вирус может находиться в живом состоянии от нескольких часов до нескольких дней. Попав в организм, он с током крови достигает печени и уже в ее клетках начинает размножаться, повреждая их.

Выработанные организмом лимфоциты для борьбы с вирусом тоже губительно действуют на печень. Поэтому очень важно провести своевременную и качественную диагностику. Биохимический анализ на гепатит С позволяет выявить болезнь и обнаружить природу ее появления.

Полимеразная цепная реакция на гепатит С

Анализ полимеразной цепной реакции ПЦР делается всем людям, у которых были обнаружены антитела к этой болезни. В результатах указывается запись «обнаружен» или «не обнаружен».

Особенностью анализа ПЦР является то, что вирус можно обнаружить, даже если в крови пациента содержится минимальное количество вирусных элементов. Другой важной особенностью данного исследования является то, что он дает количественный показатель содержания вируса в крови.

Если была выявлена отрицательная ПЦР, считается, что в данный период вирус может быть в спящем состоянии. Диагностика гепатита С с помощью ПЦР дает большую вероятность достоверности показателей. Это позволяет выявить инфекцию на ранних сроках заболевания, когда в крови еще не выработались антитела.

ПЦР условно делится на два вида: качественная и количественная. При качественном исследовании в крови пациента выявляется РНК HCV. Количественный же анализ направлен на измерение уровня РНК HCV в биологическом материале.

Благодаря этому врачи могут наблюдать активность размножения вирусов в организме больного (вирусная нагрузка). После того как начата противогепатитная терапия, анализ ПЦР проводится регулярно, с определенной периодичностью, чтобы выявить динамику болезни.

Это делается в следующих целях:

  1. Для выявления эффективности проводимого лечения.
  2. Для определения точных дозировок лекарственных препаратов.
  3. Для установления сроков приема медикаментов.
  4. Для подбора нужных антивирусных средств.

Помимо этого, эффективность терапии определяется по биохимическому анализу крови. Основу лечения составляет пегилированный или простой альфа-интерферон вместе с рибавирином. Пройдя вовремя анализ ПЦР на гепатит С, вы сможете выявить болезнь, что в значительной степени определит успех дальнейшего лечения.

Как передается заболевание?

В быту гепатит практически не передается, только в крайних случаях, например, после повреждения кожных покровов при использовании общей бритвы, ножниц больного человека. При попадании крови инфицированного человека на рану здорового вероятность заразиться велика. При половом контакте также имеется риск заражения, но он минимален.

Большая вероятность подхватить вирус есть в медицинских учреждениях, косметологических кабинетах, там, где нарушаются нормы гигиены. Но если инъекции, стоматологические услуги, косметические процедуры, переливание крови производятся одноразовыми инструментами с использованием гигиенических перчаток, то риск заразиться любым из видов гепатита сводится к нулю.

Заболевание может передаться и от инфицированной матери к ребенку в момент родов. В зону риска попадает и медицинский персонал. Поэтому существует ряд работников, которым следует регулярно проходить анализы на обнаружение вируса гепатита С, придется сдавать их систематически, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие болезни.

Гепатит С — это опасное заболевание, долго протекающее без каких бы то ни было симптомов; если вовремя его не обнаружить, то оно переходит в стадию цирроза, который вылечить невозможно.

Подготовка и процедура сдачи биоматериала

Подготовительные процедуры для проведения этого анализа не нужны. Все, что касается индивидуальных случаев, заранее обсуждается с лечащим врачом.

Процедура прохождения исследования включает в себя следующие действия:

  1. Накладывается жгут на предплечье, чтобы на время остановить циркуляцию крови. Это нужно для обнаружения вены на руке, которая начинает активно проступать сквозь кожу.
  2. Место введения иглы протирается спиртом.
  3. Игла вводится в вену.
  4. К игле крепится трубка, куда поступает кровь из вены.
  5. После забора нужного количества крови игла вынимается.
  6. К месту укола прикладывается марлевый или ватный тампон.
  7. Место укола прижимается согнутой рукой.

Следует иметь в виду следующее:

  1. В настоящий момент вакцины для профилактики гепатита С не существует.
  2. После заражения антитела формируются на протяжении недели и более, поэтому на ранних этапах заболевания анализы на вирус С могут дать ложный результат. Важно провести несколько исследований в случае подозрения на инфекцию.
  3. Все доноры крови и органов проходят в обязательном порядке анализы на наличие гепатита С.
  4. При подозрении на инфицирование, возможно, понадобятся и другие анализы для выяснения того, насколько поражена печень. Может быть произведена проверка на билирубин, щелочную фосфатазу, аланинаминотрансферазу и аспартатаминотрансферазу.
  5. Медицинские учреждения в обязательном порядке предоставляют сводки о заражении некоторыми видами вирусов. При обнаружении вспышки гепатита С в регионе местные здравоохранительные органы должны оповестить через СМИ всех жителей, находящихся в группе риска.

При подозрении на болезнь в первую очередь нужно провести качественный анализ, который даст достоверные результаты.

Количественный пцр гепатит с

Гепатит С — вирусное заболевание печени, вызываемое флавивирусом HCV (от англ. hepatitis C virus), в структуре которого содержится молекула рибонуклеиновой кислоты (РНК). РНК несет генетический код вируса. Ее наличие позволяет проводить анализ ПЦР на гепатит С.

Опасность HCV для человека заключается и в том, что так называемое серологическое окно (промежуток времени между заражением и появлением реакции со стороны иммунной системы) может быть достаточно длительным — от нескольких недель до шести месяцев.

Это не дает обнаружить инфицирование и начать лечение вовремя.

В зависимости от индивидуальных особенностей организма носителя HCV может проявляться в острой форме, а также протекать как хроническое заболевание, которое потребует длительного и дорогостоящего лечения. При выявлении антител к HCV проводится ряд лабораторных анализов, в том числе ПЦР на гепатит С. Этот тест делается всем людям, в чьей крови были найдены антитела к HCV.

Что такое анализ ПЦР?

Для лечения заболеваний печени наши читатели успешно используют метод Елены Малышевой. Читать далее >>>

Лабораторный анализ ПЦР на гепатит С — исследование биологического материала с целью выявить наличие флававируса.

Полимеразная цепная реакция (так расшифровывается аббревиатура) показывает количественное значение вирусного поражения организма, его качественные характеристики, а также генотип вируса, содержащего РНК.

На их основе, а также на базе дополнительных анализов определяется способ и длительность терапии, а также эпидемиологический фактор (степень риска передачи другому носителю).

Что такое РНК-анализ на гепатит С?

ПЦР гепатита С еще называют РНК-анализом (HCV RNA), т.к. флававирус содержит в себе частицу РНК размером вириона 30-60 нм. Одной из особенностей этого микроорганизма является высокая склонность к мутациям.

Каждый из подвидов (генотипов) вируса имеет различную резистентность, что обуславливает разные методики лечения и характер дальнейшего прогноза для пациента.

Биологический материал (венозная кровь) сдается натощак и, как правило, тестируется методом Real-Time PCR (высокочувствительной диагностики в режиме реального времени с нижним лимитом определения 15 МЕ/мл с применением закрытых автоматизированных систем).

Существуют другие тесты, например COBAS AMPLICOR с сенситивностью 50-100 МЕ/мл. Для любого лабораторного исследования важен порог чувствительности, т.е. способности реагента выявить минимальную концентрацию вируса в биологическом материале.

Виды анализа на гепатит С методом ПЦР

ПЦР на гепатит С включает в себя три важных составляющих:

  • качественный анализ;
  • количественный анализ;
  • генотипирование.

Эти тесты позволяют определить характер виремии, а также генетические признаки возбудителя. В зависимости от чувствительности диагностической системы, исследование проводится один раз, и иногда для подтверждения или уточнения результатов делается повторный тест с более чувствительным реагентом.

Качественный ПЦР гепатита С

Анализ ПЦР на гепатит С качественный — это другое общее название анализа полимеразной цепной реакции. Стандартная чувствительность теста, позволяющего выявить наличие вирусного поражения, находится в пределах 10-500 МЕ/мл.

Негативный анализ ПЦР на гепатит С показывает, что концентрация вируса в крови пациента находится ниже порога восприимчивости диагностической системы.

Если качественный ПЦР дал ответ «не обнаружено», то для последующего лечения важно узнать порог чувствительности реагента.

Белковые фракции к флававирусу появляются значительно позже.

Количественный ПЦР гепатита С

ПЦР гепатит С количественный — это показатель вирусной нагрузки, который отображает уровень концентрации РНК флававируса в организме. Это показатель, отображающий, сколько фрагментов вирусной РНК содержится на один кубический сантиметр крови. Результаты ПЦР РНК гепатита С количественного теста в общепринятой системе обозначаются в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл) и могут записываться разными способами, например — 1,7 млн или 1.700.000 МЕ/мл.

Количественная ПЦР диагностика гепатита С назначается пациентам перед началом противовирусной терапии, и на 12 неделе лечения, чтобы оценить результаты выбранного метода борьбы с HCV. Вирусная нагрузка позволяет определить три важных показателя заболевания:

  • инфекционность, т.е. степень риска передачи вируса от одного носителя к другому (чем выше концентрация РНК флававируса, тем выше вероятность заразить другого человека, например, при половом контакте);
  • метод и эффективность лечения;
  • длительность и прогноз противовирусной терапии (чем выше вирусная нагрузка, тем дольше длится лечение).

Количественная ПЦР диагностика гепатита С зависит от типа лабораторного теста и порога его чувствительности. Нижней границей нормы принято считать показатель до 600.000 МЕ/мл, среднее значение находится в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и выше считаются высоким уровнем концентрации РНК-содержащего вируса.

Генотипирование

Ввиду высокой мутационной активности HCV в природе при тестировании важно выявить, какой именно генотип вируса находится в крови пациента. Всего на планете зафиксировано 11 генотипов вируса гепатита С, в которые входят множество подвидов (субтипов). На территории РФ распространены 1,2 и 3.

ПЦР РНК гепатита С вместе с генотипированием — очень важная составляющая анализа, т.к. позволяет врачу определить резистентность (устойчивость) вируса, подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения.

Генотипирование также позволяет и косвенно определить состояние печени. Например, 3 генотип HCV нередко сопровождается стеатозом, при котором в клетках органа накапливается жир.

Анализ крови на ПЦР при гепатите С должен выдать цифру, определяющую генотип. В лабораторных ответах может быть написано «не типируется» — и это значит, что в крови человека находится вирус, не определяемый тестовой системой. Это может говорить о том, что генотип нехарактерен для данной географической зоны. В этом случае следует повторно сдать анализ с более высокой чувствительностью системы диагностирования.

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С

Тест на гепатит С ПЦР количественный расшифровать можно на основе приведенных выше данных. При получении результатов лабораторных анализов обычно пишутся следующие данные:

  • «найдено»/ «не найдено» (ПЦР качественный на гепатит С);
  • количество РНК-содержащих фракций, например 831.680 ME/мл (анализ на ПЦР количественный);
  • цифра, определяющая генотип HCV, например — 1, 2, 3, 4;
  • название теста — чаще всего Real-time.

Наиболее важным при расшифровке анализа ПЦР на гепатит С считается второй пункт, который показывает вирусную нагрузку, определяющую прогноз, способ и длительность лечения.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Для лечения заболеваний печени наши читатели успешно используют метод Елены Малышевой. Читать далее >>>

Для расшифровки лабораторных анализов важно обратиться к гепатологу или инфекционисту, который разъяснит полученную информацию в соответствии с видом диагностической системы и порогом ее чувствительности. В медицинской практике существует множество данных анализов крови, которые могут ввести человека без медицинского образования в заблуждение.

Например, если тест на гепатит С ПЦР отрицательный, а ИФА положительный, то может обозначать, что в данный момент в крови пациента нет HCV, но ранее он перенес острую форму гепатита С. Принято считать, что позитивный иммуноферментный анализ (ИФА) показывает, что в крови есть антитела, выработанные после вторжения вируса в прошлом. Но в современной медицинской практике ИФА анализ считается недостаточно надежным и нередко дает нетипичные результаты, поэтому врачи используют его в качестве первичного скрининга. При диагностике заболевания специалисты ориентируются именно на ПЦР тесты.

Полезное видео

В следующем видео очень подробно и интересно рассказывается, в чем суть метода ПЦР, как проводится анализ:

Заключение

Для анализа на ПЦР гепатита С обычно берется венозная кровь. Чаще всего происходит двойной забор биологического материала — для ИФА, и непосредственно для ПЦР теста. Для корректных результатов тестов требуется соблюдение основных правил лабораторного забора биологического материала:

  • кровь на анализ сдается в первой половине дня натощак;
  • между приемом пищи и забором крови должно пройти не менее 8 часов;
  • перед сдачей анализа нужно также исключить алкоголь и жареную пищу;
  • в течение суток перед сдачей крови необходимо избегать высоких физических нагрузок.

Результаты тестирования крови обычно готовы на следующий день.

Анализ ПЦР на гепатит – что это и зачем делают?

Почему необходим анализ ПЦР при подозрении на гепатит С, что это такое?

Вирус гепатита С – РНК содержащий вирус, имеет 6 генотипов и до 500 субтипов. Из всех гепатитов этот вирус обладает самой высокой мутационной способностью и преодолевает защитный барьер иммунной системы. Из общего числа заболевших гепатитами, вирус С стал причиной 70% случаев хронической формы и 30% цирроза и рака печени.

Суть способа: часть исследуемого гена с помощью специальных ферментов и условий заставляют размножаться в пробирке. Анализ ПЦР позволяет определить штамм вируса, без которого невозможно провести результативное лечение: каждый генотип по-разному чувствителен к антивирусным препаратам. Применяется два типа ПЦР:

Противовирусная терапия нуждается в постоянном контроле, чтобы своевременно скорректировать лечение, для этих целей также используется полимеразная цепная реакция.

Качественный и количественный ПЦР

ПЦР качественный на гепатит С дает ответ: есть ли в крови пациента штамм вируса С и какой именно. Генотипирование необходимо для уточнения диагноза, прогноза заболевания и определения сроков лечения.

По принятой классификации ген обозначается числом, а подтип маленькой латинской буквой.

Расшифровка таблицы генотипов вируса С:

  • Генотип 1а, 1b, 1с
  • Генотип 2а, 2b, 2с, 2 d
  • Генотип 3а, 3b, 3с, 3d, 3e, 3f
  • Генотип 4а, 4b, 4с, 4d, 4e, 4f, 4g, 4 h, 4 i, 4 j
  • Генотип 5 а
  • Генотип 6 а

Самые распространенные генотипы 1,2,3. В России чаще всего встречаются 1а, 1b, 2 и 3 штаммы вируса С.

Генотип вируса 1b труднее других поддается лечению, в 90% переходит в хроническую форму, из которых 30% перерождаются в рак или цирроз печени.

Генотипы 2а и 3а имеют степень хронизации 33-50 %, более отзывчивы на противовирусную терапию.

При подтверждении присутствия вируса проводится ПЦР количественный на гепатит С, с помощью которого рассчитывают количество молекул РНК, находящихся в лабораторном образце больного.

Расшифровка анализа

Качественный ПЦР анализ имеет два ответа:

ПЦР отрицательный означает, что возбудитель в образцах крови не обнаружен.

Положительный ответ свидетельствует об обратном: обнаружены РНК того или иного генотипа вируса С.

Вероятность достоверности результата равна 95%. Остальные 5% — это ошибка по вине человека. Такая возможность допускается из-за высоких требований к проведению исследования:

  • правил хранения реактивов;
  • соответствующей квалификации медперсонала;
  • чистоты биоматериала.

Сам набор ПЦР имеет 100% диагностическую точность.

Количественный ПЦР РНК гепатита С позволяет определить вирусную нагрузку на организм больного. С его помощью:

  • уточняется стадия заболевания (острая, хроническая);
  • определяется эффективность противовирусного лечения;
  • выясняется необходимость биопсии печени.

В некоторых случаях больной не ощущает никаких признаков болезни, в то время как методом ПЦР установлено инфицирование ВГС. Это означает, что заболевание находится на ранней стадии развития либо в хронической форме. Для уточнения диагноза необходимы дополнительные исследования, для скорейшего начала противовирусного лечения.

Вирусная нагрузка при гепатите С

Вирусная нагрузка показывает активность печеночного вируса, насколько активно происходит его размножение.

ПЦР количественный гепатита С измеряется в Международных Единицах на 1 мл или МЕ/мл, что означает, сколько в 1 мл исследуемой крови обнаружено копий рибонуклеиновой кислоты определенного штамма вируса С.

Какая считается высокой, какая низкой?

Анализ на вирусную нагрузку позволяет определить наличие вирусных РНК в концентрации 50 МЕ/мл. Вирусная нагрузка в норме это когда ПЦР не обнаружено ни одной молекулы РНК ВГС.

Таблица вирусной нагрузки:

  • низкая – концентрация от 600 МЕ/мл 3*104 МЕ/мл;
  • средняя – концентрация от 3*104 МЕ/мл до 8*105МЕмл;
  • высокая – уровень более 8*105 МЕ/мл.

Низкая вирусная нагрузка – это сигнал, что терапевтическое лечение подобрано правильно, и прогноз на излечение от гепатита С – благоприятный.

Высокая концентрация вирусных клеток свидетельствует, что болезнь находится в острой фазе. Кровь пациента является опасным источником инфекции.

Вирусная нагрузка, показатели которой находятся на среднем уровне, характеризует либо хроническую стадию ГВС, либо может иметь два тренда развития: к ее повышению или понижению.

По ее окончании – через 6 месяцев делается контрольная ПЦР.

Стоимость ПЦР диагностики

Поводом для беспокойства должны стать следующие симптомы:

  • общая слабость;
  • изменение цвета кожи, глазных склер, выделений;
  • тошнота;
  • снижение аппетита;
  • боли в мышцах и суставах;
  • тяжесть в правом подреберье;
  • повышенный уровень в крови АСТ и АЛТ.

При контакте с инфицированными больными, в предоперационный период, при гемодиализе также рекомендовано обследование.

Государственные клиники делают анализ крови на ПЦР бесплатно, если имеется направление от инфекциониста или гепатолога.

Платные услуги по ПЦР диагностике оказывают во всех крупных российских городах. Стоимость зависит от типа теста, имеющегося оборудования, сроков проведения и других факторов.

Качественный ПЦР анализ в Москве и С-Петербурге обойдется от 600 до 900 руб. В регионах – от 300 до 800 руб.

Определение вирусной нагрузки гепатита С будет стоить 17000-22000 руб. Для прочих видов инфекции цена количественного исследования: 1200-10000 руб.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

В чем преимущества метода полимеразной цепной реакции перед другими диагностическими способами?

  1. Широкий спектр применения. С помощью ПЦР, используя типовое оборудование, можно определить любой вирус.
  2. Точность определения возбудителя. Применяя различные комбинации ферментов и технику проведения анализа, достигается 100% спецификация исследования для обозначенной инфекции.
  3. Высокая чувствительность. Методика позволяет выявить присутствие в крови одной молекулы вируса.
  4. Оперативность. Качественный анализ бывает готов через несколько часов, количественный – через двое суток.
  5. Диагностика вируса в инкубационном периоде. При ПЦР возбудитель определяется не по наличию антител, когда уже имеется иммунная реакция организма, а до начала патологического процесса, что облегчает лечение.

Недостатки ПЦР являются следствием ее достоинств:

  • для чистоты анализа требуется высочайшая степень чистоты, в том числе воздуха в лаборатории, чтобы «чужие» ДНК не попали в исследуемый образец;
  • высокие требования к персоналу, осуществляющему забор и анализ биоматериала.

Определение гепатита

Вирусные гепатиты занимают важное место среди заболеваний печени. Тяжесть протекания заболевания, сложность лечения выносят их на первое место среди патологии другой природы этого органа.

Все гепатиты подразделяются на острые и хронические. К острым относят гепатит А и В. Среди хронических на первом месте гепатит С.

Данное заболевание вызывается вирусом гепатита С. Характерной чертой является то, что заболевание долгое время может протекать без каких-либо клинических проявлений.

Передается оно преимущественно через кровь. С током крови вирус заносится в печень, где начинает размножаться в ее клетках. В результате накопления вирионов происходит разрушение зараженного гепатоцита. В ответ на это начинают вырабатываться антитела, которые начинают атаковать остатки гепатоцитов. Из-за этого со временем нарабатывается пул против клеток печени, что усугубляет течение заболевания.

Из-за того, что болезнь протекает малосимптомно или бессимптомно, а клинические признаки появляются только при значительном поражении клеток, эта болезнь требует создания методов диагностики, позволяющих выявить ее наличие и принять соответствующие меры.

Диагностика гепатита С: качественный и количественный анализы

В настоящее время для диагностики гепатита С используются такие методы, как биопсия печени, иммунограмма.

Они позволяют непосредственно определить наличие пораженных гепатоцитов (исследование биоптата печени) или специфических антител против пораженных клеток (иммунограмма). Однако существует метод, который позволяет достоверно определить наличие самого вируса. Это ПЦР — полимеразная цепная реакция.

Суть этого метода заключается в том, что в определенных условиях происходит наработка цепей РНК. Это происходит из-за того, что в крови или исследуемом биоптате имеются фрагменты вирусной частицы. При соединении их с некоторыми молекулами в среде происходит синтез цепей, комплементарных вирусной РНК. При их последующем анализе и сопоставлении с известной нуклеотидной последовательностью вируса гепатита С удается выявить, имеется ли в организме данный вирус и присутствует ли поражение печени.

ПЦР проводится после выявления в крови специфических антител против вируса гепатита. После проведения теста выносится результат — РНК “обнаружено” или “не обнаружено”. Изредка он может гласить “недостаточно материала” — в таком случае необходим повторный анализ на гепатит С.

Если количество вирусных частиц меньше необходимого минимального количества, то можно говорить о том, что гепатита нет, а минимальные количества генетического материала могли быть “спутаны” из-за мимикрии генетического материала или некоторых последовательностей нуклеотидов, которые случайно смогли совпасть с таковой у вируса.

  1. При ПЦР отрицательный результат может наблюдаться, когда в самом деле имеются вирусные частицы в крови, однако их настолько мало (заражение произошло недавно или проведению анализа предшествовала длительная и интенсивная противовирусная терапия), что тест-система просто не смогла нормально определить их концентрацию. РНК — «не обнаружено».
  2. Если ПЦР имеет положительный результат, то вирусных частиц в крови наблюдается настолько много, что их количество превышает нижний порог чувствительности тест-системы. В этом случае высок риск развития инфекционного процесса (или он уже присутствует в довольно запущенной стадии). Обычно высокое количество вируса уже является показанием к лечению и последующей пересадке печени.

Иногда тест может становиться ложноположительным или ложноотрицательным.

Ложноотрицательный результат ПЦР гепатита наблюдается в том случае, когда в среде для проведения реакции присутствуют некоторые компоненты, которые ингибируют образование копий вирусной частицы. Из-за этого не удается получить истинной картины состояния крови, что способствует пропуску вируса и прогрессированию заболевания. На реакцию может повлиять и присутствие в крови гепарина (за счет снижения относительной вязкости крови). Неправильная интерпретация анализа возможна и тогда, когда не были соблюдены условия транспортировки и хранения исследуемого материала.

Ложноположительные результаты, когда диагностируется гепатит С, ПЦР чаще всего дает при загрязнении пробирки или рабочей среды. Кроме того, положительные результаты могут наблюдаться при наличии и вирусов гепатита других групп (за счет перекрестного реагирования).

Качественный анализ ПЦР на выявление гепатита С

Наличие в крови большого количества криоглобулинов тоже непосредственно влияет на проведение ПЦР. Из-за этого перед проведением анализа на гепатит С обязательно нужно определить в крови их концентрацию, чтобы выявить искажение результата заранее и предотвратить его.

После проведения указанных тестов становится понятно, имеются ли в крови вирусные частицы. При их определении рекомендовано немедленно начинать противовирусную терапию с целью замедления прогрессирования процесса. В отличие от гепатита В, полного излечения от гепатита С не наблюдается; болезнь лишь переходит в латентную стадию и начинает протекать медленнее. Поражение печени при этом неизбежно. На последней стадии процесса, когда печень уже не справляется со своей функцией, может потребоваться ее трансплантация.

Лечение проводится преимущественно двумя препаратами — интерфероном и рибавирином.

Доказана их эффективность в замедлении процесса поражения гепатоцитов. Попутно обязательно назначается инфузионная терапия с целью облегчения работы печени.

Все пациенты, у которых наблюдалось увеличение количества вирусных частиц в крови, обязательно находятся на учете у гепатолога. Несколько раз в год им рекомендуется проходить профилактический осмотр с целью определения прогрессирования процесса и своевременного выявления показаний к трансплантации. Кроме того, можно использовать и гепатопротекторы, хотя мнения врачей несколько расходятся. Одни считают, что данные препараты позволяют приостановить процесс и защитить еще не пораженные гепатоциты; другие же убеждены, что толку от их приема нет и следует проводить интенсивную противовирусную терапию.

Таким образом, гепатит С относится к категории заболеваний, выявление которых составляет некоторые трудности. Совершенствование методов диагностики, а также своевременные профилактические осмотры позволят снизить частоту развития данного заболевания. Немаловажной является и профилактика данной болезни. Следует тщательно избегать контактов с кровью, отказаться от приема наркотиков, только тогда это заболевание будет искоренено. Главное в профилактике и лечении — сознательное отношение пациента к своему здоровью.

Перечень необходимых исследований

Какие анализы нужно сдать при гепатите С? Для точной диагностики болезни, выявления ее причин и определения состояния паренхимы печени требуется выполнение таких исследований:

  • общего анализа мочи и крови;
  • биохимического анализа крови;
  • анализа методом ПЦР;
  • анализа крови на выявление антител к HVC;
  • анализа крови на имеющиеся антитела к собственным печеночным клеткам;
  • биопсии печени.

Расшифровка анализа крови на гепатит С выполняется специалистом. Рассмотрим каждый способ исследования подробнее, а также разберемся какой анализ на гепатит С самый точный.

Общий анализ

При выполнении общего анализа крови при гепатите С можно оценить состояние пациента. Изменения показателей крови не воспринимаются, как специфические симптомы гепатита, однако при данном заболевании происходят такие нарушения, как:

  • снижается концентрация гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов;
  • повышается содержание лимфоцитов;
  • нарушается свертываемость крови;
  • увеличивается скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Общий анализ мочи дает возможность обнаружить в ее составе уробелин — желчный пигмент, возникающий в моче в результате нарушения функционирования печени.

Биохимический анализ

Биохимический анализ крови при гепатите С позволяет выявить такие нарушения, как:

  • повышено содержание ферментов печени (аланинтрансаминазы — АЛТ и аспартатаминотрансферазы — АСТ), которые поступают в кровь при повреждении гепатоцитов. В нормальном состоянии данные показатели у мужчин не должны быть более 37 МЕ/л, у женщин — не выше 31 МЕ//л. Повышенная концентрация АЛТ и АСТ при гепатите С, протекающем бессимптомно, часто является единственным симптомом данного заболевания. Кроме этого, в составе крови увеличивается уровень глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы (в норме не выше 150 МЕ/л).
  • содержание билирубина (как общего, так и прямого) в крови превышено. Если уровень желтого пигмента в сыворотке крови превышает 27-34 мкмоль/л, возникает желтуха (до 80 мкмоль/л в легкой форме, 86-169 мкмоль/л — в среднетяжелой, выше 170 мкмоль/л — в тяжелой форме).
  • Понижен уровень альбуминов, концентрация гамма-глобулинов, наоборот, повышена. Гамма-глобулины состоят из иммуноглобулинов — антител, которые защищают организм от болезнетворных веществ.
  • увеличена концентрация триглицеридов в составе крови.

Исследование ПЦР

При помощи методики ПЦР можно диагностировать возбудителя болезни. Выполнение этого анализа дает возможность обнаружить в составе крови вирус, даже если количество его минимально. Анализ ПЦР на гепатит С позволяет определить в крови имеющуюся инфекцию уже по прошествии 5 дней с момента заражения, то есть задолго до того, как появятся антитела.

Если результат анализа крови на гепатит С методом ПЦР положительный, это говорит о присутствии активной инфекции в организме. При помощи данного метода можно провести качественное и количественное исследование РНК HVC.

Такую диагностическую процедуру выполняют в том случае, если в крови выявлены анти-HVC.

Расшифровка анализа на гепатит С содержит информацию о том, что в организме инфекция или выявлена, или не выявлена. В нормальном состоянии патологические вещества в составе крови не обнаруживаются.

Если анализ на гепатит С дает положительный результат, это говорит о том, что патогенный микроорганизм непрерывно делится и поражает печеночные клетки.

Результаты такого анализа могут оказаться недостоверными, это возможно в следующих случаях:

  • при загрязнении используемого биоматериала;
  • при наличии в крови гепарина;
  • при наличии химических или белковых субстанций (ингибиторов) в исследуемом биоматериале, влияющих на элементы ПЦР.

Количественный анализ на гепатит С дает информацию о количестве вируса, содержащегося в крови, то есть определяет вирусную нагрузку. Под данным понятием подразумевается объем РНК HVC, присутствующий в крови (например, в 1 мл). В расшифровке количественного анализа на гепатит С это значение выражено в цифровом эквиваленте, измеряется в МЕ/мл.

Кровь на ПЦР при гепатите С сдают перед проведением терапевтических мероприятий. После анализ выполняют на 1, 4, 12 и 24 неделях. Исследование на 12 неделе является показательным и выполняется с целью оценки эффективности проводимых лечебных процедур.

Если анализ на гепатит С при беременности положительный и при этом значения вирусной нагрузки превышены, то риск передачи болезнетворных микроорганизмов от больной матери к ребенку увеличивается в несколько раз. Также при повышенных значениях вирусной нагрузки осуществление лечебных мероприятий затруднительно.

Согласно расшифровке анализов на гепатит С, если значения вирусной нагрузки превышают 800 000 МЕ/мл, то она является высокой. Если показатели ниже 400 000 МЕ/мл, уровень вирусной нагрузки считается низким.

Анализ на гепатит С методом ПЦР считается самым точным и обладает рядом преимуществ перед другими вариантами исследований, а именно:

  • прямая диагностика возбудителя болезни. При выполнении традиционных исследований определяются наличие белковых маркеров, являющихся продуктами жизнедеятельности болезнетворных веществ. Это говорит только о том, что инфекция присутствует в крови. При сдаче анализа на гепатит С методом ПЦР возможно определить вид возбудителя опасной патологии.
  • специфичность методики. В ходе такой процедуры в биоматериале определяется уникальный участок ДНК, соответствующий лишь одному типу возбудителя. Это позволяет минимизировать вероятность получения недостоверных результатов.
  • высокая чувствительность. При выполнении ПЦР-анализа можно обнаружить минимальное количество вируса. Это важно, если выявляются условно-патогенные вещества, представляющие угрозу только в случае повышения их уровня.
  • при использовании такой методики в одном образце биоматериала можно выявить сразу несколько возбудителей.
  • можно обнаружить скрыто протекающие инфекции. Помимо этого, анализ позволяет диагностировать болезнетворные микроорганизмы, обитающие внутри клеток и имеющие высокую антигенную изменчивость.

Отрицательный анализ ПЦР на гепатит С означает, что следы инфекции в биоматериале отсутствуют.

Иммунологическое исследование

Данный способ позволяет определить антитела ко всем видам вируса гепатита, а также антитела к печеночным клеткам собственного организма, возникновению которых способствует развитие аутоиммунного гепатита.

Результаты, полученные в ходе исследования, актуальны на протяжении 3 месяцев, затем следует повторно сдавать кровь на гепатит С.

Возможно также выполнение экспресс-исследования с применением специальных тестовых полосок. Данный анализ дает возможность определить в составе крови и слюны антитела к вирусу С. Такую процедуру можно осуществить самостоятельно, на дому.

Биопсия печени

Для выполнения такого анализа берут элемент паренхимы печени и выполняют гистологическое исследование полученного биоматериала. Это позволяет оценить состояние органа: выявить воспалительные, некротические очаги, стадию фиброза и прочее.

Для оценки стадии поражения печени и интенсивности процесса воспаления применяют специфические биомаркеры венозной крови. С помощью Фибротеста можно оценить степень разрастания фиброзной ткани.

При выполнении Актитеста можно получить информацию об интенсивности патологических процессов в паренхиме печени. С помощью Стеатотеста можно диагностировать жировое перерождение ткани печени и оценить степень этого процесса. Фибромакс состоит из всех вышеуказанных тестов и может включать в себя некоторые другие исследования.

Подготовка к проведению исследования

Какие анализы сдают при гепатите С и как выполняется тот или иной вид исследования мы выяснили. Не менее важно знать, как нужно подготовиться к проведению анализа.

Для получения достоверных результатов рекомендуется придерживаться следующих требований:

  • анализы при гепатите С необходимо сдавать в утренние часы, на голодный желудок. Последний раз пищу следует употреблять минимум за 8 часов до выполнения исследования.
  • Забор биоматериала можно осуществлять и в дневное или вечернее время. В таком случае важно, чтобы между последним приемом пищи и выполнением анализа прошло не меньше 5-6 часов.
  • перед сдачей крови на гепатит С следует отказаться от чая, кофе, сока или других напитков, разрешена только вода.
  • за 48 часов до проведения исследования необходимо исключить употребление жирных, жареных продуктов и спиртсодержащих напитков.
  • на протяжении минимум часа до выполнения анализа нужно воздержаться от табакокурения.
  • не следует выполнять анализ сразу после проведения ультразвукового, инструментального, рентгенологического обследования, сеанса массажа или физиотерапии.
  • за сутки до осуществления исследования требуется исключить прием медикаментозных средств и интенсивную физическую активность. Эмоциональные нагрузки также противопоказаны.
  • 15 минут перед выполнением исследования рекомендуется провести в спокойном состоянии.

Проведение процедуры забора крови

Где сдать анализ на гепатит С? Забор биоматериала для дальнейшего исследования проводится в лаборатории медицинского учреждения или же на дому у пациента.

Кровь из вены берут следующим образом:

  • при помощи специального жгута, обернутого вокруг предплечья больного, приостанавливается венозный кровоток. Благодаря таким манипуляциям вены наполнятся кровью и будут более заметными, что значительно облегчит процесс введения иглы.
  • участок кожи, куда будет вводиться игла, тщательно обрабатывается спиртом или спиртсодержащей жидкостью.
  • в вену осторожно вводится игла, затем к ней прикрепляется пробирка, специально предназначенная для сбора крови.
  • сразу после того, как игла введена в вену сдавливающий жгут снимается с руки пациента.
  • после того, как собран необходимый для выполнения анализа объем крови, игла плавно вынимается из вены.
  • к месту укола обязательно прикладывается стерильный ватный или марлевый тампон, смоченный в спирте.
  • для предупреждения возникновения гематомы тампон следует с некоторым усилием прижать к области введения иглы, согнуть руку в локтевом суставе и держать в таком положении несколько минут. Такие действия также помогут быстрее остановить кровь.

При условии хорошей техники внутреннего введения данная процедура абсолютно безопасна и прочти не вызывает болезненных ощущений.

В редких случаях после забора крови возможно опухание вен. Данное явление носит название «флебит». Устранить проблему поможет компресс (не горячий), прикладывать его следует к опухшим участкам кожи несколько раз в сутки.

Также могут возникать определенные проблемы, если имеется нарушение свертываемости крови. Прием аспирина, варфарина и иных средств, разжижающих кровь, может спровоцировать кровотечение. Именно поэтому перед выполнением анализа требуется отказаться от приема любых медикаментов. Если же лечение отменить нельзя, следует сообщить об этом специалисту.

Сроки и цены

Сколько делается анализ на гепатит С? Результаты исследования крови на гепатит могут быть готовы и через несколько часов, и через несколько дней (как правило, не более 8 дней). Длительность подготовки результатов зависит от вида вируса и выбранной методики анализа. Более быстрым является исследование, проводимое способом ПЦР. Результаты в этом случае будут готовы всего через несколько часов.

Следует знать, что для формирования достаточного объема антител к HVC может потребоваться несколько недель. Поэтому на раннем этапе развития патологии результат исследования может быть ложноотрицательным.

Кроме этого, получение недостоверных данных возможно при некачественном выполнении анализа и нарушении условий транспортировки полученного биоматериала (образцы должны быть доставлены в лабораторию максимум через 2 часа после забора крови).

Если результат исследования окажется положительным, необходимо незамедлительно обратиться к врачу-инфекционисту. Специалист проведет дополнительное обследование и назначит соответствующее лечение.

Как вылечиться от гепатита C с 97%-ной вероятностью?

Сегодня современные препараты нового поколения Софосбувир и Даклатасвир с 97-100% вероятностью навсегда излечат вас от гепатита C. Новейшие лекарства можно приобрести в России у официального представителя индийского фармгиганта Zydus Heptiza. Заказанные препараты доставят курьером в течение 4 дней, оплата после получения. Получить бесплатную консультацию по применению современных препаратов, а также узнать о способах приобретения вы можете на официальном сайте поставщика Zydus в России.

Автор: Юлия Барабаш

ПЦР анализ

Качественный анализ указывает на наличие вируса в крови. Данный тест необходимо проводить всем пациентам, у кого обнаружены антитела к гепатиту С. Его результат может быть «обнаружено» или «не обнаружено». Референсные значения (значение, которое должно быть в норме) — «не обнаружено». Результат «обнаружено» может свидетельствовать о том, что вирус размножается и инфицирует все новые клетки печени. Качественный тест ПЦР имеет определенную чувствительность (10-500 МЕ/мл.). Это означает то, если вирус присутствует в крови в очень малой концентрации (ниже порога чувствительности метода), может быть получен результат «не обнаружено». Поэтому, при проведении качественного ПЦР у пациентов с низкой виремией (концентрацией вируса), например, проходящих противовирусную терапию, важно знать чувствительность диагностической системы. Для контроля вирусологического ответа при проведении противовирусной терапии желательно использовать диагностическую систему с чувствительностью не ниже 50 МЕ/мл. Таким критериям соответствуют, например, анализаторы COBAS AMPLICOR ВГС-TEST (аналитическая чувствительность 50 МЕ/мл или 100 копий/мл), РеалБест РНК ВГС (аналитическая чувствительность 15 МЕ/мл или 38 копий/мл) и другие.

Стоимость пцр

ПЦР анализ, стоимость которого зависит от применяемых реактивов, и может составлять от 300 руб. до 5000 руб., выполняется от одних суток до недели.

Кроме метода ПЦР для выявления РНК ВГС также используется метод транскрипционной амплификации (ТМА), обладающий лучшей чувствительностью (порядка 5-10 МЕ/мл.), однако этот метод в России пока не распространен.

Как часто нужно делать ПЦР гепатита C? Обычно его проводят сразу после обнаружения антител к гепатиту C и после 4-й, 12-й, 24-й недели противовирусной терапии, а также через 24 недели после завершения ПВТ, а затем — ежегодно, в случае УВО.

Рис. 1. Пример результатов качественного ПЦР гепатита С.

Количественный анализ ПЦР (вирусная нагрузка) — это тест на концентрацию вируса (виремию) в крови. Вирусная нагрузка — это количество единиц генетического материала (вирусной РНК), которая присутствует в определенном объеме крови (обычно это 1 мл, что соответствует 1 кубическому сантиметру). Это количество выражается в цифрах, единицы измерения МЕ/мл (международные единицы на миллилитр). Количество вируса может быть отображено по-разному. Например, 1,5 млн МЕ/мл, что соответствует 1.500.000 МЕ/мл или 1.5* 10 6 МЕ/мл. В некоторых лабораториях используются другие единицы измерения — копии/мл. Коэффициент пересчета из копий в международные единицы различный для разных тест-систем. Примерно значения можно пересчитать по формуле 1 МЕ/мл = 4 копии/мл, например, 5.5* 10 5 МЕ/мл = 2.2* 10 6 копий/мл.

На что же влияет вирусная нагрузка?

Во-первых, на инфекционность. Чем выше концентрация вируса, тем выше риск передать вирус, например, при половых контактах или вертикальным путем. Во-вторых, концентрация вируса влияет на эффективность лечения (если лечение будет проводиться на основе интерферона). Так, низкая вирусная нагрузка является благоприятным фактором при проведении терапии, а очень высокая – неблагоприятным. Также, количественный ПЦР имеет большое значение при проведении интерфероновой терапии для оценки ее успешности и планировании длительности курса. Так, при быстром ответе на лечение и низкой виремии перед терапией, сроки лечения могут быть сокращены. И, наоборот, при медленном снижении концентрации вируса, ПВТ может быть продлена.

Какая нагрузка считается низкой, а какая — высокой?

Высокой принято считать нагрузку свыше 800 *10 3 или 800.000 ME/мл, что примерно составляет 300*10 4 или 3.000.000 копий /мл. Нагрузка свыше 1*10 7 ME/мл считается очень высокой. Однако до сих пор среди специалистов нет общего мнения о значениях, разграничивающих высокую и низкую виремию. Так, в некоторых работах этой границей считается цифра 400.000 ME/мл.

Как часто нужно делать количественный тест?

Обычно его делают перед проведением терапии и после 12-й недели лечения для оценки ее эффективности в случае, если качественным тестом РНК еще определяется.

Результатом количественного теста может быть количественная оценка виремии в формате, описанном выше, а также результаты «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено».

Порог чувствительности количественного ПЦР обычно выше, чем качественного. Так, для системы COBAS AMPLICOR он составляет 600 ME/мл. Результат «не обнаружено» может означать, что количественный тест и подтверждающий качественный тест не обнаружил вирусную РНК. Результат «ниже диапазона измерений» означает, что количественный тест не выявил РНК гепатита С, но вирус присутствует в очень малой концентрации (в случае, если при этом был проведен дополнительный подтверждающий качественный тест).

Рис.2 Пример результатов количественного теста.

Вам все еще кажется, что вылечить печень тяжело?

Судя по тому, что вы сейчас читаете эти строки — победа в борьбе с заболеваниями печени пока не на вашей стороне.

И вы уже думали о хирургическом вмешательстве? Оно и понятно, ведь печень — очень важный орган, а его правильное функционирование- залог здоровья и хорошего самочувствия. Тошнота и рвота, желтоватый или сероватый оттенок кожи, горечь во рту, потемнение цвета мочи и диарея. Все эти симптомы знакомы вам не понаслышке.

Но возможно правильнее лечить не следствие, а причину? Рекомендуем прочитать историю Ольги Кричевской, как она вылечила печень. Читать статью >>

ПРЦ-метод исследования крови при гепатите C: для чего нужен и как действует?

К сожалению, организм не всегда своевременно реагирует адекватным иммунным ответом на попадание вируса гепатита С, в большинстве случаев заболевание проходит скрытно и больной узнает о своем диагнозе только на стадии осложнений. Связано это с уникальной способностью вируса – мутацией. А лимфоциты, вырабатываемые как ответ на воспалительный процесс, начинают работать не только против вируса, но и клеток печени, чем, к сожалению, усугубляют положение. Поэтому, определяется наличие или отсутствие вируса в крови по ее анализу, одним из которых является метод ПРЦ диагностики. ПРЦ на гепатит С – это анализ, проводимый по принципу полимеразной цепной реакции, позволяющий определить вырабатываются ли в организме антитела к провокатору заболевания. Благодаря такому исследованию, можно поставить точный диагноз уже через 10 дней, что, непременно, позволит начать важное лечение своевременно. Другого, более точного, способа определения присутствия вируса гепатита С на ранних этапах на данный момент не существует.

Вирус гепатита С снабжен молекулой РНК, которая и, собственно, определяется через короткое время в крови больного. Это гены вируса. Т.к. заражение происходит через кровь, вирусу не сложно с током крови оказаться в печени и начать свою губительную деятельность. В зависимости от стойкости иммунитета и генотипа вируса, определяется скорость развития заболевания и его вероятные осложнения. 80% больных имеют дело с хроническим гепатитом, который, как правило, осложняется фиброзом печени.

Так ли необходима ПРЦ-диагностика?

Важность ПРЦ-исследования заключается в самом факте диагностики. Такой анализ позволит с точностью узнать какая инфекция спровоцировала заболевание, а также подобрать правильное лечение. Это особо актуально при гепатите, ведь любой неэффективный препарат вредоносно действует на, и без того, воспаленную печень.

Впервые провел исследование Кэрри Муллис в 1983 году. До этого, узнать возбудителя болезни можно было невозможно, равно, как и получить образец болезнетворного генетического материала.

Сам вирус, после открытия анализа, стали изучать только в 1989 году, тогда же его отделили от вирусов гепатита А и В. Было выделено 40 разновидностей гепатита С, а также установлено, что он способен мутировать. Именно в этом основная особенность и опасность вируса, он может приспосабливаться и вырабатывать антитела, благодаря которым многие препараты, к сожалению, не способны победить болезнь.

Преимущества ПЦР-диагностики заключаются в:

  • определении самого вируса-возбудителя болезни и выделении его вида;
  • малом количестве ошибок, т.к данным методом исследуется ДНК вируса;
  • высокой чувствительности, что позволяет обнаружить вирусы на начальных стадиях, когда распространение еще в процессе.

Разновидности ПЦР-диагностики и расшифровка их результатов

Медиками проводится два вида ПЦР-исследований крови:

А также отдельно стоит подчеркнуть возможность выделения генотипа, поступившего в кровь вируса.

Качественный анализ

Метод качественного исследования назначается с целью обнаружения вируса в крови, поэтому результат анализа может быть только в двух вариациях:

Результат «Не обнаружено» является нормой. Однако возможен ложноотрицательный ответ, что связано с крайне малым количеством вируса в крови.

Но если качественный анализ имеет результат «Обнаружено», такое заключение указывает на наличие возбудителей болезни в крови обратившегося.

Количественный анализ

Количественный анализ ПРЦ служит для определения концентрации вируса в крови или, иными словами, вирусную нагрузку на организм. Анализ позволяет узнать количество вирусов на единицу взятой у больного крови, определить степень виремии. В свою очередь, виремия – это состояние, определяемое в медицине, когда вирусы попали в ток крови и распространяются по всему организму. Также результат количественного анализа позволит судить о заразности больного.

Расшифровывается результат количественного анализа следующим образом. В результате анализа указаны цифры, это – количественный показатель вирусной нагрузки. Для выражения концентрации вирусов используется исчисление в МЕ (международная единица) на мл, либо количество копий на мл. Наиболее часто используется шифрование в МЕ. Как правило, 1 МЕ/мл сравнимо с 4 копиями/мл.

Соответственно, по объему обнаруженных вирусов можно судить о тяжести заболевания.

Количественный анализ ПРЦ может назначаться во время противовирусной терапии, на разных ее сроках. Как правило, это происходит на 1-й,4-й, 12-й и 14-й неделях. Необходимо исследование, в данном случае, для понимания эффективности проводимого лечения, когда результат не оправдывает ожиданий, терапию корректируют и ждут следующего срока для проведения анализа.

В зависимости от стоимости исследования, оно может проводиться двумя способами:

  • недорогим Р-ДНК методом, который наиболее часто, собственно, и используется. Его недостаток в невысоком пороге чувствительности – искомый ген обнаруживается от 500 МЕ на мл крови;
  • более дорогостоящим ТМА способом, который позволяет обнаружить во взятой крови нуклеиновые кислоты вирусных клеток. Благодаря этому, его порог чувствительности начинается от 5-ти МЕ на мл. Его стоимость окупается в том плане, что ТМА диагностику достаточно провести единожды, в отличие от предыдущего метода, ведь чтобы получить достоверный результат необходимо повторять исследование.

Стоит принять во внимание, что по полученным данным исследования невозможно определить степень изменений, произошедших в печени. Эту информацию могут предоставить только биохимия, биопсия или эластометрия.

Генотипирование вируса гепатита

Метод ПРЦ-исследования крови также позволяет определить генотип попавшего в организм вируса. Врачу результат анализа полимеразной цепной реакции необходим для подбора адекватной противовирусной терапии.

Всего медицине известно 11 генотипов гепатита С, шифруемых цифровым кодом, и множество субтипов под буквенной шифровкой. Наиболее важно обнаружить один из пяти генотипов вирусного гепатита С: 1а, 1b, 2а, 2b или 3а. Из них, самым часто обнаруживаемым является тип 1b, реже встречаются 3а, 1а и 2а.

1b вызывает хронизацию воспалительного процесса в 90% случаев, течение заболевания данного типа осложнено, есть большая вероятность развития цирроза или рака печени. А, например, 3а перетекает в хронический гепатит в 35% случаев и развивается со стеатозом и выраженным поражением желчевыводящих каналов.

Что влияет на результат?

К сожалению, ложных результатов современная медицина исключить пока не в состоянии. Они возможны при:

  • нарушении процесса взятия крови и ее транспортировке в неправильных условиях;
  • имеющихся в крови ингибиторах, как химической, так и белковой природы;
  • наличии гепарина в образце крови.

Как подготовиться к анализу?

Чтобы результат анализа соответствовал действительности, важно правильно подготовиться к сдаче крови. Для этого необходимо:

  • сдавать кровь натощак, чтобы крайний прием пищи состоялся не менее 8-ми часов назад;
  • с утра, если есть желание, выпить только воды, чай и, тем более, кофе пить перед анализом нельзя;
  • сдавать кровь только в спокойствии;
  • за час до того, как войти в манипуляционный кабинет, не курить;
  • за сутки до предполагаемой сдачи крови не поддаваться стрессам, выполнять только посильные физические действия, а также не менять схему питания;
  • желательно прийти к лаборанту после полноценного сна;
  • важным правилом является сдача крови до приема лекарств или же после их отмены выдержать 10-12 дней, но, в то же время, если назначены больному гормональные препараты, то их график приема нарушать запрещено;
  • не сдавать кровь после проведения рентген-обследований и физиотерапии.

Кто сказал, что вылечить печень тяжело?

  • Вас мучает ощущение тяжести и тупая боль в правом боку.
  • А неприятный запах из рта не добавит уверенности.
  • И как-то стыдно, если ваша печень еще вызывает сбои в пищеварении.
  • К тому же лекарства, рекомендованные врачами почему-то неэффективны в Вашем случае.

Эффективное средство от болезней печени существует. Перейдите по ссылке и узнайте, что говорить Елена малышева об уходе за печенью!

Топ продуктов полезных для печени

Что такое синдром Жильбера и как его вылечить?

Послеоперационный период после удаления желчного пузыря | Лапароскопия | Лапаротомия

Диета при холецистите желчного пузыря

Способы лечения и профилактики приступов желчнокаменной болезни

Как влияют вирусные гепатиты на беременность? Можно ли продолжать лечение хронических форм?

Что такое токсический гепатит и чем он отличается от вирусного? | Код по МКБ 10

Диета при холецистите желчного пузыря

Оглавление1 Питание в стадию острого холецистита1.1 Овсяный кисель1.2 Как приготовить слизистую кашу?1.3 Овощное суфле2 Питание при хроническом периоде болезни3 Что будет если не соблюдать диету?4 […]

Как питаться при болезнях печени и поджелудочной железы?

Оглавление1 Кому необходимо диетическое питание?2 Какой должна быть пища?3 Что будет, если не соблюдать диету?4 Рекомендации по питанию5 Примерное меню по диете на день Заболевания […]

Топ продуктов полезных для печени

Оглавление1 Какие продукты разрушают печень?2 Что полезно для печени?3 Какие овощи и фрукты полезны для печени?4 Полезные для печени мясо и рыба5 Кисломолочные продукты и […]

Чем питаться при камнях в желчном пузыре?

Оглавление1 Общие рекомендации2 Примерное меню для больного желчнокаменной болезнью на пять дней2.1 Понедельник2.1.1 Как приготовить суфле из кролика?2.2 Вторник2.2.1 Какие овощи подобрать для овощного салата?2.3 […]

Питание и рецепты блюд при желчнокаменной болезни

Оглавление1 Что есть нельзя?2 Что можно?3 Основные принципы питания4 Диетические блюда и их рецепты4.1 Паровой белковый омлет4.2 Домашние диетические сосиски4.3 Суп-пюре из риса и мяса4.4 […]

Источник: http://medicinavdome.ru/zhisn-pri-gepatite/ptsr-kolichestvennyj-gepatit-s-kak-sdavat



Источник: medstati.ru


Добавить комментарий