Отрицательный пцр на гепатит

Отрицательный пцр на гепатит

Содержание статьи:

Что такое ПЦР анализ и вирусная нагрузка?

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.

пцр на гепатит с

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это лабораторный метод определения ДНК и РНК. Впервые он был опробован почти полвека назад американцем Кэри Муллисом. Этот сверхчувствительный анализ способен определить носителя генома по одной исходной молекуле, содержащейся в крови, слюне или коже.

Метод ПЦР имеет огромные перспективы, находит применение не только в медицине, но и в генной инженерии, и в криминалистике. С его помощью клонируют и создают новые виды ДНК, определяют степень родства. По кусочку эпителия, найденного на месте преступления, устанавливают преступника.

Анализ ПЦР на гепатит – что это и зачем делают?

Почему необходим анализ ПЦР при подозрении на гепатит С, что это такое?

Фото 1

Вирус гепатита С – РНК содержащий вирус, имеет 6 генотипов и до 500 субтипов. Из всех гепатитов этот вирус обладает самой высокой мутационной способностью и преодолевает защитный барьер иммунной системы. Из общего числа заболевших гепатитами, вирус С стал причиной 70% случаев хронической формы и 30% цирроза и рака печени.

Суть способа: часть исследуемого гена с помощью специальных ферментов и условий заставляют размножаться в пробирке. Анализ ПЦР позволяет определить штамм вируса, без которого невозможно провести результативное лечение: каждый генотип по-разному чувствителен к антивирусным препаратам. Применяется два типа ПЦР:

  • качественный;
  • количественный.

Противовирусная терапия нуждается в постоянном контроле, чтобы своевременно скорректировать лечение, для этих целей также используется полимеразная цепная реакция.

Качественный и количественный ПЦР

ПЦР качественный на гепатит С дает ответ: есть ли в крови пациента штамм вируса С и какой именно. Генотипирование необходимо для уточнения диагноза, прогноза заболевания и определения сроков лечения.

Фото 2

По принятой классификации ген обозначается числом, а подтип маленькой латинской буквой.

Расшифровка таблицы генотипов вируса С:

  • Генотип 1а, 1b, 1с
  • Генотип 2а, 2b, 2с, 2 d
  • Генотип 3а, 3b, 3с, 3d, 3e, 3f
  • Генотип 4а, 4b, 4с, 4d, 4e, 4f, 4g, 4 h, 4 i, 4 j
  • Генотип 5 а
  • Генотип 6 а

Самые распространенные генотипы 1,2,3. В России чаще всего встречаются 1а, 1b, 2 и 3 штаммы вируса С.

Генотип вируса 1b труднее других поддается лечению, в 90% переходит в хроническую форму, из которых 30% перерождаются в рак или цирроз печени.

Генотипы 2а и 3а имеют степень хронизации 33-50 %, более отзывчивы на противовирусную терапию.

При подтверждении присутствия вируса проводится ПЦР количественный на гепатит С, с помощью которого рассчитывают количество молекул РНК, находящихся в лабораторном образце больного.

Расшифровка анализа

Качественный ПЦР анализ имеет два ответа:

  • отрицательный;
  • положительный.

ПЦР отрицательный означает, что возбудитель в образцах крови не обнаружен.
Положительный ответ свидетельствует об обратном: обнаружены РНК того или иного генотипа вируса С.

Фото 3

Вероятность достоверности результата равна 95%. Остальные 5% — это ошибка по вине человека. Такая возможность допускается из-за высоких требований к проведению исследования:

  • правил хранения реактивов;
  • соответствующей квалификации медперсонала;
  • чистоты биоматериала.

Сам набор ПЦР имеет 100% диагностическую точность.

Количественный ПЦР РНК гепатита С позволяет определить вирусную нагрузку на организм больного. С его помощью:

  • уточняется стадия заболевания (острая, хроническая);
  • определяется эффективность противовирусного лечения;
  • выясняется необходимость биопсии печени.

Фото 4

В некоторых случаях больной не ощущает никаких признаков болезни, в то время как методом ПЦР установлено инфицирование ВГС. Это означает, что заболевание находится на ранней стадии развития либо в хронической форме. Для уточнения диагноза необходимы дополнительные исследования, для скорейшего начала противовирусного лечения.

Вирусная нагрузка при гепатите С

Вирусная нагрузка показывает активность печеночного вируса, насколько активно происходит его размножение.

Что это?

ПЦР количественный гепатита С измеряется в Международных Единицах на 1 мл или МЕ/мл, что означает, сколько в 1 мл исследуемой крови обнаружено копий рибонуклеиновой кислоты определенного штамма вируса С.

Какая считается высокой, какая низкой?

Анализ на вирусную нагрузку позволяет определить наличие вирусных РНК в концентрации 50 МЕ/мл. Вирусная нагрузка в норме – это когда ПЦР не обнаружено ни одной молекулы РНК ВГС.

Фото 5

Таблица вирусной нагрузки:

  • низкая – концентрация от 600 МЕ/мл 3*104 МЕ/мл;
  • средняя – концентрация от 3*104 МЕ/мл до 8*105МЕмл;
  • высокая – уровень более 8*105 МЕ/мл.

Низкая вирусная нагрузка – это сигнал, что терапевтическое лечение подобрано правильно, и прогноз на излечение от гепатита С – благоприятный.

Высокая концентрация вирусных клеток свидетельствует, что болезнь находится в острой фазе. Кровь пациента является опасным источником инфекции.

Вирусная нагрузка, показатели которой находятся на среднем уровне, характеризует либо хроническую стадию ГВС, либо может иметь два тренда развития: к ее повышению или понижению.

По ее окончании – через 6 месяцев делается контрольная ПЦР.

Стоимость ПЦР диагностики

Поводом для беспокойства должны стать следующие симптомы:

  • общая слабость;
  • изменение цвета кожи, глазных склер, выделений;
  • тошнота;
  • снижение аппетита;
  • боли в мышцах и суставах;
  • тяжесть в правом подреберье;
  • повышенный уровень в крови АСТ и АЛТ.

Фото 6

При контакте с инфицированными больными, в предоперационный период, при гемодиализе также рекомендовано обследование.

Государственные клиники делают анализ крови на ПЦР бесплатно, если имеется направление от инфекциониста или гепатолога.

Платные услуги по ПЦР диагностике оказывают во всех крупных российских городах. Стоимость зависит от типа теста, имеющегося оборудования, сроков проведения и других факторов.

Качественный ПЦР анализ в Москве и С-Петербурге обойдется от 600 до 900 руб. В регионах – от 300 до 800 руб.

Определение вирусной нагрузки гепатита С будет стоить 17000-22000 руб. Для прочих видов инфекции цена количественного исследования: 1200-10000 руб.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

В чем преимущества метода полимеразной цепной реакции перед другими диагностическими способами?

Фото 7

  1. Широкий спектр применения. С помощью ПЦР, используя типовое оборудование, можно определить любой вирус.
  2. Точность определения возбудителя. Применяя различные комбинации ферментов и технику проведения анализа, достигается 100% спецификация исследования для обозначенной инфекции.
  3. Высокая чувствительность. Методика позволяет выявить присутствие в крови одной молекулы вируса.
  4. Оперативность. Качественный анализ бывает готов через несколько часов, количественный – через двое суток.
  5. Диагностика вируса в инкубационном периоде. При ПЦР возбудитель определяется не по наличию антител, когда уже имеется иммунная реакция организма, а до начала патологического процесса, что облегчает лечение.

Недостатки ПЦР являются следствием ее достоинств:

  • для чистоты анализа требуется высочайшая степень чистоты, в том числе воздуха в лаборатории, чтобы «чужие» ДНК не попали в исследуемый образец;
  • высокие требования к персоналу, осуществляющему забор и анализ биоматериала.
Станьте первым комментатором!

Ложноположительный анализ на гепатит C

Ошибки в диагностической сфере медицины случаются непредсказуемо. Наиболее распространены ложноположительные результаты, получаемые в процессе разбора главного биологического материала — крови. Неправильные анализы на гепатит С не являются редкостью, если тому способствуют некоторые факторы.

Ложноположительный анализ на гепатит C вв

Что такое ложноположеительный анализ

Не всегда положительный анализ на гепатит С считается однозначным. Антитела в крови человека иногда наблюдаются в организме несколько лет. Если пациент относится к вирусоносителю, то все первичные анализы на антитела покажут ложноположительный результат.

Определить ложный результат можно только с помощью комплексной диагностики, где включается ПЦР. Это особое исследование полимеразной цепной реакции. Если он приходит отрицательным, то положительные данные первичных исследований признают неверными.

Пройти высокоточные тесты рекомендуется всем, у кого есть риск заражения патологией или появились специфические симптомы. Вы можете узнать  о том, как походит анализ на гепатит С.

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.

Ложноположительный результат на гепатит С может повергнуть в шок пациента. Заболевание считается особо опасным для печени, и редко оставляет шансов прожить 10-15 лет при прогрессировании. Если врач недостаточно компетентен в рассмотрении анализов, пациент проходит ненужное и тяжелое лечение.

Также следует учитывать:

  • По медицинской статистике ложноположительные маркеры выявляются всего в 10-15% от всех положительных анализов на гепатит.
  • Обычно такие ситуации возникают при первичной диагностике биологического материала без более углубленного исследования.
  • Эффективным и достоверным методом считается иммуноферментный анализ. Если он показал, что вируса в крови нет, это говорит об отсутствии патологии.
  • При исследовании крови на антитела, они могут быть обнаружены, но это не всегда подтверждает наличие вируса. Часто активные защитные элементы сохраняются на определенное время после успешного угнетения. Обычно при сдаче более развернутого анализа болезнь уже не обнаруживается.

Причины ложных результатов

Почему у большого количества людей обнаруживаются защитные белки к вирусу гепатита С? Факторов для появления в крови защитных телец несколько. Иногда они связаны с исследовательскими нарушениями:

 

  1. неполноценное качество лабораторных исследований;
  2. случайное использование неверного материала;
  3. ошибки сотрудников лаборатории.

Но ложноположительный результат по вине лаборантов встречается крайне редко. Чаще причиной обнаружения антител являются некоторые изменения в организме. Они провоцируют всплеск иммунитета:

  • аутоиммунные заболевания (патологии не уточненной причины);
  • формирование опухолей (доброкачественных и злокачественных);
  • иммуноглобулины в повышенном количестве;
  • увеличение концентрации парапротеинов (патологических белков плазмы крови);
  • наличие инфекций в крови, схожих по проявлению с гепатитом;
  • некоторые виды вакцинации (от гриппа);
  • длительная терапия интерфероном.

Ложноположительный анализ на гепатит C

Если все результаты на гепатит С приходят с положительными ответами, а контрольное исследование ПЦР опровергает наличие вируса, это свидетельствует об аутоиммунных нарушениях. Отследить и выявить их поможет только комплексное обследование всех органов.

Также причиной обнаружения антител в крови к гепатиту С может быть обусловлено гормональным состоянием женщины в период вынашивания плода.

Ложноположительный результат при беременности

За время развития эмбриона, а затем и плода, будущая мама сдает множество анализов. Это позволяет контролировать ее состояние и вовремя принимать меры борьбы с патологиями. Не редкость при беременности и ложноположительные первичные результаты на гепатит С, что может стать настоящим шоком для беременной.

Нередко при стрессах матери и благоприятной ситуации происходит пассивная передача антител плоду. Заражение ребенка в этом случае имеет невысокие показатели риска.

Если анализ положительный при беременности, это еще не говорит о наличии вируса в организме. Антитела продолжают свою выработку в ответ на многочисленные инфекционные агенты. Причиной ложных результатов становятся:

  • серьезные нарушения в метаболизме (обмене веществ);
  • нарушение гормонального фона и аутоиммунные нарушения;
  • очаги вирусной инфекции (грипп, простуда).

Ложноположительный анализ на гепатит C беременность

Если присутствуют вышеперечисленные состояния, организмом беременной начинается выработка антител в ответ на проникновение вредных агентов.

Чтобы исключить заболевание или подтвердить его наличие, женщине дополнительно назначается:

  • Исследование ПЦР, определяется вирусный генотип.
  • Обязательно проводится УЗИ, которое помогает выявить или опровергнуть структурные изменения тканей печени.

К сожалению, вирус гепатита С опасен отсутствием выраженных симптомов. Часто он маскируется под ранний или поздний токсикоз. У большинства ведущих врачей анализ на антитела первичного типа ставится под сомнение. Иммуноферментные исследования также могут быть противоречивыми при позднем гестозе. На этом фоне изменениям подвержен состав крови и концентрация специфических белков, подобных гормонам.

Ранее исследование крови у беременной на гепатит С способно предотвратить прогрессию вируса в организме, а также снизить риск инфицирования ребенка.

Также вы можете посмотреть видео о том как проходит анализ на гепатит С, почему бывают ошибочные анализы.

Расшифровка качественного ПЦР-анализа на гепатит C

Острый гепатит C является широко распространенной вирусной инфекцией. Заболевание антропонозное, то есть в нормальных условиях развивается только в человеческом организме. Возбудителем болезни служит вирус HCV. Для начала развития инфекции вирус должен попасть непосредственно в печень. Основным путем заражения организма является контакт с инфицированной кровью и / или ее компонентами. Вирус обнаруживается с помощью анализа крови на гепатит C методом ПЦР.

Сложность диагностики инфекции до приобретения хронической формы состоит в том, что протекает она бессимптомно. Выявляется болезнь часто случайно, во время прохождения обычных медосмотров, диспансеризации.

Особенности генетической вариабельности HCV

Организм человека не способен выявить и обезвредить попавший в организм вирус гепатита C на ранних стадиях инфицирования, что связано с генетическим непостоянством HCV. Нить РНК вируса имеет протяженность около 10 000 нуклеотидов, которые быстро замещаются.

В настоящий момент известно 6 генотипов и свыше 90 субтипов HCV. Существуют так называемые квазивиды — множественные вариации вируса гепатита C.

Внутри одного генотипа вируса образуется большое количество мутированных, генетически родственных его вариаций. Разные квазивиды одного генотипа являются результатом генетической нестабильности HCV. Они образуются в ходе мутаций при размножении вируса гепатита C.

Наличие различных вариаций одного и того же генотипа объясняет отрицательный ответ вируса на иммунные атаки организма, а также сохранение его длительной активности.

вирус гепатита с

Приобретение хронической формы болезни, безрезультатная терапия интерферонами и риск повторного инфицирования являются следствием генетической мутации вируса.

Инфицирование

Инфекция острого гепатита C передается путем попадания зараженной крови в кровоток здорового человека. Такой путь передачи называется парентеральным. В зоне высокого риска заражения находятся люди, которые могут контактировать с потенциально инфицированной кровью. Это сотрудники медицинских лабораторий, пациенты, требующие переливание крови, трансплантацию органов, а также находящиеся на диализе.

 

В салонах красоты (предоставляющих услуги пирсинга, тату, маникюра и т.д.), а также стоматологических кабинетах все манипуляции должны происходить в санитарных условиях с использованием стерильных инструментов, так как HCV может попасть в организм через загрязненные инструменты.

Отдельно следует выделить наркозависимых людей. Многократное использование одного шприца с иглой разными лицами в разы повышает риск инфицирования. Именно наркоманы составляют большую часть больных гепатитом C и являются переносчиками вируса HCV.

В бытовых условиях инфекция может распространяться через личные средства гигиены: зубные щетки, бритвенные принадлежности.

Все способы передачи инфекции, кроме контакта с кровью, называются общим словом непарентеральный путь заражения. Таким способом гепатит C передается крайне редко, что связано с малой концентрацией вируса. Половой путь передачи составляет не более 10% случаев заражения. Передача вируса с молоком кормящей матери относится к единичным случаям.

Всем, кто находится в группе повышенного риска заражения, а также тем, кто имел неосторожность контактировать с инфицированной кровью, рекомендуется сдать анализы крови на выявление HCV.

Особенности диагностики

Из-за отсутствия специфических симптомов острого вирусного гепатита C заболевание в большинстве случаев приобретает хроническую форму.

В первые несколько недель после инфицирования (в среднем 3 недели) можно обнаружить РНК вируса гепатита C в крови больного. Для выявления вируса гепатита, его вида, генотипа необходимо лабораторное исследование биологического материала: крови и ее сыворотки, лимфы, фрагментов тканей печени. Такое исследование проводится не только для диагностики, но и для определения качественной интерферонотерапии.

Как правило, антитела к HCV обнаруживаются посредством иммуноферментного анализа (ИФА). Данное исследование дает исчерпывающий ответ: «обнаружено» или «не обнаружено». Соответственно, проба положительна или отрицательна. Антитела, обнаруженные с помощью ИФА, не всегда свидетельствуют о присутствии HCV в организме. Часто такой анализ дает ложноположительные результаты. Это связано с тем, что человек когда-то заразился гепатитом C, но произошло самоизлечение, а антитела в организме остались. В случае обнаружения в исследуемой крови анти-HCV назначается дополнительное ПЦР-исследование на гепатит C.

Среди современных методов диагностики стоит выделить ПЦР-анализ на гепатит C как наиболее качественный и точный.

С помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) представляется возможным выявить возбудителя гепатита C (вирус HCV). Данная диагностическая методика может обнаружить вирус даже при минимальной концентрации HCV в биологическом субстрате спустя всего 5 дней после инфицирования. Это позволяет начать противовирусную терапию еще до значительного поражения печени, так как за такой короткий промежуток времени организм не успевает выработать антитела.

Полимеразная цепная реакция разделяется на два типа: качественная и количественная.

Качественный анализ ПЦР на гепатит C помогает выявить присутствие HCV в крови как такового. Положительный результат исследования крови методом ПЦР говорит об инфицировании организма вирусом HCV.

Делается качественный ПЦР тест на выявление гепатита C после положительного результата ИФА, то есть, когда обнаружены антитела к данному вирусу.

Расшифровка анализа ПЦР констатирует присутствие или отсутствие вируса HCV в организме, то есть результат ПЦР положительный или отрицательный соответственно.

Исследование крови здорового человека с помощью ПЦР-анализа всегда покажет отрицательный результат.

Количественный тест ПЦР определяет вирусную нагрузку (виремию), то есть концентрацию HCV в биологическом субстрате. От величины вирусной нагрузки зависит течение всей болезни в целом. При низкой концентрации интерферонотерапия завершается положительным результатом. Иногда сроки терапии могут быть сокращены.

Высокая концентрация вирусов, напротив, делает противовирусную терапию малоуспешной, повышается риск развития тяжелых осложнений. Люди, у которых высокая виремия, могут передавать гепатит C непарентеральным путем: половым, контактно-бытовым, от матери к ребенку.

Концентрация вируса в биологическом субстрате измеряется в единицах (МЕ) на 1 мл крови (реже копии/мл). Если расшифровка количественного ПЦР-анализа на гепатит C показывает виремию выше 800 000 МЕ/мл (2 млн копий/мл), то это указывает на высокую концентрацию HCV. Если количество меньше 400 000 МЕ/мл (1 млн копий/мл), то вирусная нагрузка считается низкой.

Пример результатов количественного ПЦР теста на гепатит C:

Примечание: ПЦР-анализ на гепатит C имеет нижний порог чувствительности, равный 10 единицам. Это означает, что при концентрации HCV в биологическом материале ниже порога чувствительности тест может оказаться отрицательным, хотя вирус присутствует. Низкая концентрация вируса обычно связана с проводимой противовирусной терапией.

Вирусная нагрузка (точнее, ее уровень) не определяет степень поражения печени и тяжесть заболевания. Достоверную информацию о патологии можно получить с помощью биохимических показателей исследования крови, а также биопсии фрагментов ткани печени.

Для результативной противовирусной терапии очень важным остается определить генотип НСV.

Source: lechenie-pechen.ru

Читайте также



Источник: hepc.nextpharma.ru

Читайте также
Вид:

Добавить комментарий